MSC的无血清培养效果如何

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tingwuyu 发表于 2011-10-29 09:47 ; X: q  V8 g, Z4 m' U* t" f! e
用过stemcell和gibco的无血清，坑爹啊，都不长

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我比较过Gibco的stempro、Stemcell的Mesencult-XF和Lonza的CD无血清培养基。三种培养基培养效果都FBS+MEM-A效果好，不仅细胞形态更小更均一，而且细胞生长速度也非常块。细胞即使达到200000/cm2的密度从光镜下看都还有一些小的空隙。4 i2 H, H- y$ s3 R) |
至于你说的长不好或者不长的情况，我相信你可能没有根据说明书。因为Gibco的stempro、Stemcell的Mesencult-XF这两种需要各自公司的干细胞细胞基质，加上500ml完全培养基，基本要7000元左右的价格，如果不加基质，细胞是长不出来的（这个非常重要），所以即使你铺一点gelatin都可以长得好，不过没有公司的基质优化的好而已。/ ?0 K/ O" F7 s0 H* [' i# b
而Lonza的CD无血清培养基为化学限定培养基，按照抗体无血清培养基概念应该是最高级的一种无血清培养基，Lonza的这款培养基不需要预铺细胞基质，细胞一样长得很好。不过个人认为没有铺基质的ibco的stempro、Stemcell的Mesencult-XF培养的MSC形态好。还有个问题，就是CD培养基基（或者无血清培养基）不铺基质，细胞高密度容易大片脱落（细胞贴壁不紧）。
7 {" [4 `; g( }3 m所以大家如果不要求很高密度的细胞培养，可以使用lonza CD培养基，市场价格为3000元/500ml。当然，如果对血清没有要求，使用Stemcell的Mesencult-ACF血清培养基效果也非常好。如果实在没有钱（呵呵），就用FBS培养基，不过记得加5-10ng/ml的bFGF，细胞同样会长得很好。
( O  m: m  q2 D/ [' L2 I最后，如果做分化，个人认为不要用上述无血清培养基，因为上述无血清培养基都是为MSC培养优化的，根据说明书尤其优化的对血细胞的污染。同时由于无血清培养基都是保持MSC干细胞状态所涉及的，所以添加文献报道的因子可能会被抵消很到的分化效果。所以慎重！（我没有尝试过，不过有文献报道某些因子甚至脐血浆对分化有抑制作用）