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图片——这是什么样子的污染类型   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-10-18 09:56 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
        如图所示,绒毛状的东西漂浮于培养基中,未见明显孢子,培养基液体清亮,细胞生长并未见明显影响,形态也变化不大,细胞换液后几天有重复出现,之前对培养箱也做过清洗,具体做法是:用消毒液擦洗两遍,酒精喷壶喷洗擦拭,紫外灯照射过夜。请大家帮助看一下是什么样子的污染类型,如果有老师也遇到过同种情况,恳请指导一下应对处理方法,十分感谢。
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沙发
发表于 2011-10-18 10:15 |只看该作者
真菌,能洗掉洗掉就好了,长到细胞里就没办法了。不光孵箱,室内环境也很重要
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藤椅
发表于 2011-10-18 10:15 |只看该作者
楼主介绍的不详细:
$ ^! }: d6 J) S1.培养液中是否加双抗?$ }# W1 I3 h( }, S7 M# ~
2.培养细胞是什么?组织来源?5 n2 z+ u3 F, f" x5 Z+ q1 `# M, q! q
3.绒毛状的东西是否随着培养时间而增殖?
8 z) W5 l4 k$ C5 G; |" m8 C+ @- b4.操作过程中是否有其他的器械操作不当?安全柜或超净工作台是否运转正常?/ w$ }7 B: `5 a' G2 Q' N, @
建议:5 C& J/ m. @1 C/ \. P- r; z+ l
1.回答以上问题4 O2 n% F& U# s- ~: ?6 Z
2.开拓思路,有可能是灰尘等;多查查设备,培养物品等质量是否合格?操作本人是否正确操作?
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板凳
发表于 2011-10-18 10:26 |只看该作者
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是真菌污染, 和双抗无关
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报纸
发表于 2011-10-18 10:26 |只看该作者
建议彻底清洁孵箱以及相关设备

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地板
发表于 2011-10-18 10:27 |只看该作者
一般此类污染, 培养基清亮, 细胞生长状态良好, 真菌成团, 蘑菇样生长。
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发表于 2011-10-18 10:30 |只看该作者
无法去除干净, 如果有必要, 实在是样本稀少/重要。 可以加入两性霉素B。 不过细胞毒性较大。
; s/ e# g# c3 f方法: 首先移除培养基, 尤其是菌团,反复PBS洗涤。
+ m. v$ p0 U) Y* `3 [; \% |- b消化细胞, 洗涤, 去少量细胞分装都多个培养空, 加入含两性霉素的培养基。 数日后,观察没有真菌污染的继续传代
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发表于 2011-10-18 10:46 |只看该作者
应该是真菌污染
8 ^6 g2 g" R6 \$ |呈现团状,肉眼看起来像是蘑菇状的1 ]; S5 G" i% R# |
细胞要是出现了明显污染的话就弃之吧" E! A1 g- i/ I8 y  H
真菌的孢子非常难消灭, L$ j  u* b# h" E1 ]
很容易复发的
2 L- }  C( a; @" u0 m' a/ c最好是把所有实验用具重新灭菌,屋子也照紫外,培养箱用75酒精清洁,最好是灭菌一次。
! x* u9 a3 r+ U) ]! H  M# q* j& r重新培养细胞在可疑的细胞培养中加两性霉素B或者庆大霉素
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发表于 2011-10-18 11:23 |只看该作者
我在做诱导的时候遇到过这种情况,我是用24孔板进行培养的,在培养的过程中有个别孔出现了这种情况,将之吸出,用酒精棉差擦拭污染孔,其他的也还能用,应该是真菌污染,培养箱好好清理一下,只用酒精擦拭怕是不行的。
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发表于 2011-10-18 11:48 |只看该作者
应该是真菌污染,我们一般叫长蘑菇了,空气湿度大的时候污染的机率比较大,细胞如果不是太重要直接丢了就行了,不大好处理
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