未分化小鼠胚胎干细胞表达GATA4吗？？？

xiaoyurly

染色发现有GATA4表达，real-time也有一定的表达。4 |3 |9 j; \4 C4 D3 R( \7 v: e
但有大牛说原始状态的胚胎干细胞不应表达GATA4的。. p: j* W$ r6 m- |% `; Y& p5 C
疑惑中
$ b; L4 v* k5 a' j" h& p问一下大家的细胞系是什么状态6 j& O5 j9 c  r, b5 H, E: j3 D# M
谢谢

christophe

我看我的realtime结果GATA4的比较也比较高，GAPDH约为16个cycle，GATA4约是29个cycle。! Z  N/ R7 G8 X( e/ h
你的realtime结果Gata4的cycle比内参高多少？
- r! l0 e. e" A, y+ Y* V3 h- s. g/ M

Yedan

+ a- s1 v4 W2 e
0 k$ ~! G/ Y# m! ^" ~
回复 christophe 的帖子* I5 ?* p6 F  d. `9 ]$ ~- X

$ \4 P) L0 ^) s; d0 b/ z  L定量△ct大于10一般习惯认为是没有表达了...而且还要看溶解曲线的情况，引物扩增有时候ct也会在35以内的

jn808

“定量△ct大于10一般习惯认为是没有表达了” △ct指的是？？

Yedan

3 C6 s" p& B, A' a6 |4 t  o" I
! G/ R+ q8 C! M( y0 a5 R) W回复 jn808 的帖子
3 ~, h/ G" ^1 g3 @) @3 z
" e2 p* e4 p0 Y( A$ v0 a目的基因ct减去内参ct3 f/ |8 a, h; z) u

+ Z3 U2 ~/ T6 @这是用△△ct的方法自己计算定量PCR结果必须知道的，虽然现在的PCR仪基本都直接show出relative quantity图,但是最好还是知道下怎么算得比较好，因为不是每对primer的扩增效率都是100%，而△△ct的计算方法又是建立在扩增效率为100%的前提下的。（如果用的是7500甚至是7900，当我没说过，那种机器会自己校正的，非常人性化。）