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这些天在做干细胞分离方法的一些汇总研究,看了很多相关的报道和文章,不过整个思路都还比较混乱,还是和大家分享分享吧,也希望一些专业同仁能给些意见。# c- a+ H$ j/ }$ {% ^* c! t
流式细胞技术分选法(FCM),利用流式细胞仪对处在快速、直线、流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速定量分析,同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术。主要仪器是美国BD公司的BD FACS Aria流式细胞分选仪。
' j8 g! O! \) v& ~1 f- Z5 B. Z免疫磁珠法(MACS),核心是在磁珠表面包被具免疫反应性的抗体进行抗原抗体反应,在细胞表面形成玫瑰花结,这些结合了磁珠的细胞一旦置于强大的磁场下,就会与其他未被结合的细胞分群。+ T' q" n: j3 c7 x- p* v
密度梯度离心法,用一定的介质在离心管内形成连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。
" I1 b- N0 G: [3 E0 Y负收集法,将不需要的细胞作为靶细胞用Lin抗体络合收集到一起,保留Lin阴性细胞,再用密度梯度离心法去除残留红细胞等,获得干细胞。
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# }/ N8 l( S v不过还有几点疑问:" M. h3 k* Y! }
1,如果只要用到离心机的,都应该算是离心法,包括密度梯度离心法。Ficoll、peroll、甲基纤维素、明胶、淀粉等分离液法,是不是也应该属于离心法?羟乙基淀粉沉降法,如果用离心机离心(我看有的试验用离心有的没用),那是不是也是属于离心法?这么说来,负收集法也是一种离心法?
6 f1 a7 N8 ^1 V2 w. H如果这样的话,分类应该变成FCM、MACS和离心法,离心法下分分离液法、沉降法、负收集法。
+ n+ E8 n# r5 T! f" C3 \3 u7 |) t2,国内开始引进自动化系统分离干细胞,AXP和Sepax,经常和人工的技术作比较,这两种自动化系统,都是离心法么,都用什么试剂么?
# g4 p: Y( d- I- h; w3,目前临床是用的较多的,有没有人知道都是用什么方法?' l8 A0 a% p& S$ n; R
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肯定有很多说的不对的地方,大家见笑了,多多指导! |
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