请教如何把多个因子连到一个质粒里去：episomal的构建。

wangyashuai

可以用2A肽或IRES。2A肽是在两个基因中间插入一段序列，这段序列可以翻译出一段18-20个左右的氨基酸，这段氨基酸在体内可以自己被酶识别，并切开，最后就可以把一条肽链分成好几个蛋白。IRES是内部核糖体进入位点，也是一段DNA序列，他可以折叠成类似起始氨酰tRNA的结构，使核糖体结合在他的上面，开始翻译。在你的几个目的基因中间插入IRTS也就可以使一个质粒表达出好几个蛋白因子。但IRES序列较长，多因子连在一起会是构建的质粒分子量增大，不易操作。而且其前后因子表达频率也有一些差异。