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[请教] DMEM/F12培养基颜色问题   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-12-1 08:55 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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我用双蒸水溶解DMEM/F12粉,根据说明书用碳酸氢钠调PH后液体呈深红色,用来养肿瘤干细胞,是否是正常的?
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沙发
发表于 2011-12-1 09:02 |只看该作者
没有自己配制过,但是我用的买的DMEM/F12不是深红色,建议拿出部分测下PH。
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藤椅
发表于 2011-12-1 09:08 |只看该作者
不能调到深红色,应该是浅红色才对  O  g3 ^2 S0 j& Y- E$ H
我们是一边调节一边用pH计来测其pH值的,一般调节到7.0-7.2,然后经过过滤,因为在过滤过程中pH会上升0.2左右。. n; I7 }/ @. J* a$ j) E- H2 f
细胞对酸性的耐受力较碱性要强,所以建议你以后在加上碳酸氢钠后再进行调节一下,不要太碱了
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板凳
发表于 2011-12-1 09:23 |只看该作者
DMEM/F12的颜色调至深红色只是一个经验值,是在多次配制时所积累的经验。你作为新手,要知道一般对培养基的Ph值是有要求的,多为7.2-7.4,建议根据你试验条件的要求,选用相应的Ph试纸进行测定,这样更准确一些。
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报纸
发表于 2011-12-1 10:25 |只看该作者
回复 zxiaoxiao311 的帖子* w1 V# M6 E, [  t9 U# a: b
, n6 T1 l, h9 V6 i2 `) u: @" q
DMEM/F12 pH 7.3 ± 0.2是对的,颜色和pH有关系是肯定的,但是用试纸不可靠。pH meter 更好些。
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地板
发表于 2011-12-1 10:57 |只看该作者
本帖最后由 ytumuyangren 于 2011-12-1 10:58 编辑
3 a3 R2 ~3 L- ^1 h4 k' G( _: I) I' }, o% e' E" Q
一代粉剂DMEM可以配置一升,需要NaHCO3的量是3.7g,Vc的量是50mg,
1 I' L5 Z9 H! Y$ k% U& E: N/ g4 U一代粉剂DF12可以配置一升,需要NaHCO3的量是1.2g,Vc的量是50mg,两者都不用调节PH值,DMEM的颜色比DF12的颜色红,DF12的颜色略微偏黄,然后根据你的需要加入需要量的血清。( D6 e  `5 I0 z$ L3 K3 s
祝你试验顺利。
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7楼
发表于 2011-12-1 13:02 |只看该作者
回复 dmmwhb 的帖子
. [: z! \# z3 {
) h  L. q  s' B4 v+ [7 Z# K5 H哈,貌似偏碱了。楼上的说的很清楚了,关于PH值的范围。我们实验室的经验是,在配置1LDMEM溶液的条件下,加3.7g 的NaHCO3和350ul的浓盐酸,屡试不爽,楼主可以参考下。
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8楼
发表于 2011-12-1 13:24 |只看该作者
DMEM/F12 调pH值在7.2-7.4时的颜色应该比DMEM的颜色浅一点,不是深红的。
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9楼
发表于 2011-12-2 16:57 |只看该作者
回复 chuanbaozang 的帖子
6 z* I+ a3 }3 c5 B  x& a
% W. _* e$ b1 l谢谢,你们也是用来养干细胞的吗?

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10楼
发表于 2011-12-2 17:55 |只看该作者
深红色肯定是过碱了,那个颜色就是告诉我们在使用前这个培养基是否合适,因为配置完成的基础培养基的酸碱度会随着时间越长越偏碱性,所以最好还是测下PH值,而且要是才配的培养基那是肯定不行的,一定要用PH计测试一下范围在7.2-7.4,否则时间越长越碱,细胞会无法适应,就会半死不活的苟且着,无法开展实验的
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