怎样获取单个集落里的干细胞

marshall80

在一个培养皿里，形成了一些干细胞的集落，但周围也有很多分散的已经分化的细胞，怎样才能单独获取这些集落里的干细胞呢？有什么好的建议或者方法请告知。非常感谢！

echowdk

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9 T2 \3 Z/ _$ E- U3 s- @; ~4 N9 {9 ^* b4 q" p4 U6 o; a
可以挑克隆的吧。具体操作自己查一下《小鼠胚胎操作》这本书，很详细。

fguw

可以使用机械法在显微镜下挑出没分化的克隆，

marshall80

回复 fguw 的帖子+ K. \7 v- I+ G  Q

- m4 j) Y4 O, @8 j3 C能说得具体点吗？谢谢！$ f8 m$ s: F* {- C

marshall80

谢谢你们的回复，我需要获取同一培养皿内的colony, 各位兄弟姐妹有什么好的方法，请指点。

fguw

你是说想从同一DISH里面挑出部分克隆？
: f0 ?2 c/ k4 ^! D* A  x你首先用MARKER笔在你要挑的克隆下方标记上，然后在解剖镜下找到克隆，用注射器（带针头）或者用作试验的枪把克隆挑出来，接种到有饲养细胞的板上， 我知道有些实验室用口吸管（就是用吸管连接一个烧了的玻璃毛细管），这个需要用嘴巴来控制气流。
5 C$ d  n' M+ D$ P0 v2 H% G新手可能需要练习这些，

yinjiqingqq

分离克隆有两个办法：( Z5 e# q" b* E, T6 l
1. 像楼上说的将克隆团转移出来（说的已经很详细了）# ]' {" X# _3 y  Y. `
2.将你所需要的克隆团镜下圈出来，然后用细胞刮将圈外的其他分化细胞刮掉。有些分化的细胞随着长时间的传代，就会挂掉了。# p9 k' ?  S6 P% k6 O$ K) U
个人感觉，还是第一种方法比较好，但如果你以前没有挑过克隆，或是对细胞纯度要求不高，第二种方法也未尝不可。