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[请教] 怎样获取单个集落里的干细胞 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-12-1 12:20 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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在一个培养皿里,形成了一些干细胞的集落,但周围也有很多分散的已经分化的细胞,怎样才能单独获取这些集落里的干细胞呢?有什么好的建议或者方法请告知。非常感谢!
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沙发
发表于 2011-12-1 12:59 |只看该作者
回复 marshall80 的帖子
7 ~/ o7 R# N3 ^% x: w& b* O8 r- J  Q7 P- v: q8 C; m# @' j
可以挑克隆的吧。具体操作自己查一下《小鼠胚胎操作》这本书,很详细。
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藤椅
发表于 2011-12-1 15:55 |只看该作者
可以使用机械法在显微镜下挑出没分化的克隆,
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板凳
发表于 2011-12-2 17:49 |只看该作者
回复 fguw 的帖子
+ {$ M  F! N+ t% R9 w6 _; J6 Z: b7 ~1 X9 A
能说得具体点吗?谢谢!
& W4 f# Q0 _/ p* j; ~

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报纸
发表于 2011-12-2 17:55 |只看该作者
谢谢你们的回复,我需要获取同一培养皿内的colony, 各位兄弟姐妹有什么好的方法,请指点。

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地板
发表于 2011-12-14 06:58 |只看该作者
你是说想从同一DISH里面挑出部分克隆?
$ G7 d7 Y* M! |5 _. F: U# i5 R( L你首先用MARKER笔在你要挑的克隆下方标记上,然后在解剖镜下找到克隆,用注射器(带针头)或者用作试验的枪把克隆挑出来,接种到有饲养细胞的板上, 我知道有些实验室用口吸管(就是用吸管连接一个烧了的玻璃毛细管),这个需要用嘴巴来控制气流。
( L) t, a+ _' x9 Z6 W4 ?新手可能需要练习这些,
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发表于 2011-12-14 10:05 |只看该作者
分离克隆有两个办法:( X( J) J3 o+ D$ v2 p# O. a2 i
1. 像楼上说的将克隆团转移出来(说的已经很详细了)
7 L  q  n5 H3 ]) U' z( v0 ~2.将你所需要的克隆团镜下圈出来,然后用细胞刮将圈外的其他分化细胞刮掉。有些分化的细胞随着长时间的传代,就会挂掉了。% {" _, f, ~3 `1 I$ j
个人感觉,还是第一种方法比较好,但如果你以前没有挑过克隆,或是对细胞纯度要求不高,第二种方法也未尝不可。
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