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本帖最后由 susannajoke 于 2011-12-1 22:00 编辑 / b5 w: I; K% c" F
2 Z7 s& s# _3 A: n" E0 g
以下是常用的免疫荧光的二抗荧光基团，前面的可由后面的Alexa Fluor或DyLight 荧光标记物所替代：
% p2 @5 ^) F, G: CAMCA, coumarin——Alexa Fluor 350；2 \7 G2 U' m6 k Q+ M
Cascade Blue——Alexa Fluor 405、DyLight 405 ；" e' g) a% t* w, S8 S
Cy2, FITC (fluorescein)——Alexa Fluor 488、DyLight 488；
& Z- h T% i, t" U9 t) dCy3, TRITC (tetramethylrhodamine) ——Alexa Fluor 555、DyLight 549；9 Y% i/ ]: n/ ^" s
Rhodamine Red——Alexa Fluor 568；
! w7 O; ~* N* l" {9 H1 {5 STexas Red——Alexa Fluor 594、DyLight 594；
4 y6 w6 e' d% \+ b6 oCy5——Alexa Fluor 633, Alexa Fluor 635, or Alexa Fluor 647、DyLight 649；
* R7 r5 |( e+ S E, B( gCy5.5——Alexa Fluor 680；
' d' {; c$ Q% ]# R. F! X# q, ICy7——Alexa Fluor 750。3 H) L# |! e6 U" N
下图为染料激发光谱和发射光谱，希望你结合你们的荧光显微镜光源来选择合适抗体，加粗的染料是我推荐的。0 J4 T" g8 T# {8 K* C- D
% f1 `) y; I+ \
, D! j4 C# e/ [
5 U$ q8 x2 v$ r( n4 S
附两张图片& e# `0 ~; s" {& Y; R! h
! d2 F9 [3 x h Z) `0 c5 P- d& M7 E
8 P$ ^4 K- g% [# V+ { r其中，Alexa Fluor为Molecular Probes(Invitrogen)公司产品，DyLight 为Jackson公司产品。
* P/ m" F6 R, C' ^; O! yAlexa Fluor 350——亮蓝和紫外光激发；5 v! K2 c% Y" n4 ?' P$ Z+ E3 L
Alexa Fluor 405——近乎完美的匹配蓝色二极管激光器；
. _# g3 q; C1 P( J% S- k8 m7 TAlexa Fluor 488——最好的绿色荧光基团；) e3 Z; |/ m {; q. W
Alexa Fluor 546——Cy3 和四甲基罗丹明的替代物；* @) d8 j1 z. j7 }% W" m: s6 o# X
Alexa Fluor 555——优于Cy3 的替代物；
' n1 W, S4 S$ n% V: M% iAlexa Fluor 647——优于Cy5 的替代品；, ^; A# N' f! R
Alexa Fluor 700——远红光二极管激光器的最适染料；
5 E) X) I$ r; \' l& ^
( Q1 |, M0 Q! F3 e3 f; f# z& Z有什么问题可以交流，我正在做免疫荧光多标，我不染细胞核，但要染一个蛋白用蓝色DyLight 405 二抗标记，其余为Alexa Fluor 488、Cy3、Alexa Fluor 647。 |
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发表于 2011-12-1 20:29
发表于 2011-12-1 21:53
