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楼主: jiojoo	go [请教] 请帮忙分析下RNA电泳结果 [复制链接]

linzi214

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楼主

发表于 2011-12-12 16:01 |显示全部帖子

1.5%琼脂糖凝胶电泳10~15min就好，每个孔上样3~5ul RNA量，不要电泳太久。一般OD值测出来结果比较好的话，我们实验室只在第一次跑电泳鉴定抽提效果，后来直接做QRT，效果一样好，不过最好每次都电泳看一下

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linzi214

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沙发

发表于 2011-12-12 16:07 |显示全部帖子

本帖最后由 linzi214 于 2011-12-12 16:11 编辑

也可以将RNA和DNA电泳系统分开来用。RNA最好抽提定量后就先逆转录一批cDNA，然后保存在-80oC，这样不容易降解，逆转录为cDNA的样本更易保存。

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linzi214

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藤椅

发表于 2011-12-21 16:36 |显示全部帖子

加入Trizol吹打混匀后室温放置5min，加入氯仿颠倒混匀至分层液体变为均匀的小的粉色油状颗粒，总之一句话充分混匀，然后静置10min至分层，离心。离心后转移上层清澈液体即RNA至一干净EP管中，注意不要吸到白色的中间层。一帮情况下这样做是OK的。你再试一下，宁缺毋滥，再保证RNA量的情况下，还要主要RNA的纯度。