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求助!免疫组化测肿瘤组织CD133,阳性率太高怎么回事。 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-12-9 10:07 |显示全部帖子
1.把阴性对照的图片传上来,先看阴性对照。# _  ]4 i2 r/ Y+ i/ v) ]
2.你用的修复方式是什么?不同的修复方式及修复方法对阳性结果有很大的影响
: u4 K' `# i9 p0 x" f3.染色时间是多久?) B( c; O# {" F, A
4.一抗、二抗的孵育条件是什么、种类属别别搞错。
$ _" o& L6 K! l- J总之,综合以上的问题,把各个条件优化到最佳。你的实验仅仅是刚开始,没有优化,出现假阳性有可能。
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沙发
发表于 2011-12-9 14:53 |显示全部帖子
抗体浓度过高造成的,有这种可能!!) @5 e- o* a* ]
实验条件摸索的建议如下
& Z8 r2 F/ P6 Y/ v% b- D' S2 e4 s/ P0 _1.一抗反应条件4度过夜,设置好不同的浓度梯度
0 i  N$ {  y+ }+ Y4 j; S1 H2.可以试试不用高压修复,或者减少高压修复时间,看看效果。
( g6 t* C! J$ n5 `3.最后的显色时间、显色液的浓度应该降低。
  K! i" X: q; u- o/ {3 Z# e3 ?$ X根据你提供的信息,这个抗体的阳性部位在细胞膜,针对抗体的建议如下:# Q$ l: ?4 H* l
1.更换抗体,从其他的单位找到这个抗体和阳性病理切片,即阳性片,国内很好买到,做着看看,应不成问题,没多少钱。经费不够不是理由,大不了自己掏钱。' k' j# ], O3 a3 p
2.联系santa售后服务,要他们来解答。
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