成骨诱导11天后Alizarin Red staining，求鉴定

hxf_86

6 \  l. C* y9 J( w

: t( l$ O8 u6 [6 r* P5 a这是我成骨诱导11天后的钙结节染色，大概流程如下
' A, s5 M* @6 `% t2 d1 XPBS洗2遍，95%酒精固定10min，ddH2O洗3遍，然后0.1%Alizarin Red染色（做了个时间梯度，分别是5,15,30min），然后ddH2O洗3遍，拍照。下面是图片，求各位大侠鉴定~谢谢~
7 J+ ?1 b- I- N- S' p; L" w* o染色30min-1
5 z6 H* f- j+ S4 v2 s7 U8 w染色30min-2( B& j  N8 q9 _- R
染色15min
1 c. B3 n5 d; v1 h" I染色5min

wangzhiqi86

不清楚为什么要用双氧水处理呢？固定洗涤后，直接染色就好了啊

luoziwei

wangzhiqi86 发表于 2011-12-8 22:54
5 A6 d( g0 W* q# h1 ~! s不清楚为什么要用双氧水处理呢？固定洗涤后，直接染色就好了啊

$ R4 [7 l! [; a6 S5 |& g
大哥，那是ddH2O，是双蒸水，不是双氧水

luoziwei

楼主是不是把茜素红染色液的pH调高了，偏碱性的染色就是不太正。不好说你的染色是不是钙结节，当然我也遇到过这种染色。从我的经验来说，如果ph控制在5以下的话，就有60%的可能性不是的。

wangzhiqi86

回复 luoziwei 的帖子3 H/ J! ^) s9 W% W  N
( f9 A: A( F  N5 i
不好意思，看错了，我还纳闷，只有免疫组化里面才会用到双氧水啊。茜素红染色确实和染料的pH值有关

tjutiger

所用细胞是MSC么？11天就开始染色。。。

ljzmy82

MSC诱导分化吗，要是干细胞分化没有这么快的呀，得20天左右吧

细胞-77

回复 luoziwei 的帖子/ L- n5 @1 y; x% v
% S# |. _% U, {5 N
可否把你的茜素红试剂配制和染色步骤分享一下吗？谢谢

luoziwei

我已经在论坛里说了几次，都有详细步骤的，你可以查看看嘛

hxf_86

luoziwei 发表于 2011-12-9 10:03
# K8 l4 U; G, m0 j6 `楼主是不是把茜素红染色液的pH调高了，偏碱性的染色就是不太正。不好说你的染色是不是钙结节，当然我也遇到 ...

( m4 D( T  a" X2 Z  y你好，谢谢你的回帖~我把PH调到8.3了。那请问你PH调到多少为合适呢？