大家都是怎么用腺病毒转染干细胞啊

sannia

我的大体步骤是：
0 L- B* ]! v' I# Z4 }* F0 h! z: ?' m6 ]' U9 Q
用293X细胞做出病毒' D9 i5 l$ e9 R% P6 A8 ]
把病毒溶液直接加到比较小的干细胞克隆上 （2次）; `6 D3 b5 G4 L8 S0 F
等细胞长满后，在分细胞，打成较小的克隆
* O: s' B8 e  u, f' E' ?然后用抗生素筛选阳性克隆
8 Q3 _+ [1 N7 X+ e+ b/ X2 E6 P7 e# r6 E4 d' U' z
因为我用的是一个诱导表达系统，当我加入诱导剂后发现只有一小部分（10%）细胞表达了目标基因
4 G0 L' P1 g3 \" U; f但是所有的克隆都是抗性筛过的8 \6 N  T8 t, ]( D9 g4 @

) \1 K# D9 d& i2 e& n+ |4 c4 O所以， 搞不清楚为什么效率很低
3 R2 O# i6 ~1 W3 t2 {" _# ?/ S
5 ~  H) T/ C0 [2 U) \3 ?1 L( T希望高手指点！
8 }- \9 t. Q& b7 s, A5 i) \: H, R# C

tlms1991

感觉是腺病毒滴度不够。腺病毒是瞬时转染，我的理解是转进细胞后目的基因不会随细胞传代，所以病毒数量要足。

三木一叶

有10％就知足吧，哈哈，我是转进去，一点迹象都没有呢

晴斗斗

还没做到这一步，前几步问题就很多

lvmanrong

我也想知道，大侠，高手在哪儿啊？