大家都是怎么用腺病毒转染干细胞啊

sannia

我的大体步骤是：  [% a6 |7 k% c* b0 v- X

. h2 S" D1 X3 i+ d: Y" ~用293X细胞做出病毒
+ K- [' n  `4 o4 l9 K: z5 g) h把病毒溶液直接加到比较小的干细胞克隆上 （2次）
% X3 \1 H6 {4 r0 F* ?等细胞长满后，在分细胞，打成较小的克隆, C! g) T; q( ?% V$ H7 S5 ~: z
然后用抗生素筛选阳性克隆' A. u1 R2 D4 k1 y: u
& X9 }, Q: s5 u( ?* ~: }1 K
因为我用的是一个诱导表达系统，当我加入诱导剂后发现只有一小部分（10%）细胞表达了目标基因7 P" m) o2 K5 e' R# L3 f
但是所有的克隆都是抗性筛过的
, p* g5 \) D3 L# p* J' f1 ]0 V+ x
所以， 搞不清楚为什么效率很低# ^  D9 z6 ?5 w& ^" A' @; U

& c$ J3 k/ w$ B, M. q. }希望高手指点！% U/ b. Z' k/ Y# A& E* P, l1 x* b
) m+ z1 {( W# z! D2 s3 T, L: O2 o. h

lvmanrong

我也想知道，大侠，高手在哪儿啊？

晴斗斗

还没做到这一步，前几步问题就很多

三木一叶

有10％就知足吧，哈哈，我是转进去，一点迹象都没有呢

tlms1991

感觉是腺病毒滴度不够。腺病毒是瞬时转染，我的理解是转进细胞后目的基因不会随细胞传代，所以病毒数量要足。