大家都是怎么用腺病毒转染干细胞啊

sannia

我的大体步骤是：4 A, f7 u1 _8 A, V
( e( q; `* Q$ H3 v
用293X细胞做出病毒' w# Z' o/ ]9 x3 W8 y( K1 L
把病毒溶液直接加到比较小的干细胞克隆上 （2次）
  w9 }2 I) i" W. l4 K8 V) I等细胞长满后，在分细胞，打成较小的克隆
# E- I/ E: o; Z然后用抗生素筛选阳性克隆
5 ?$ g% \$ g8 O. h( n/ }
3 P6 R7 G6 d5 l5 p& B6 K- |因为我用的是一个诱导表达系统，当我加入诱导剂后发现只有一小部分（10%）细胞表达了目标基因" O# y, a1 L( t5 Z! S7 F& h
但是所有的克隆都是抗性筛过的
* K: o1 [8 G: _; M5 |
- }9 {1 R; l, V- |所以， 搞不清楚为什么效率很低
8 ~8 d4 H; w  g5 n) s) u
& H; S, F' i, ]3 b7 ?5 L9 w' I希望高手指点！
" e3 \5 T. q3 Q% ]5 A6 u1 ?* i7 [8 p/ Q4 K

lvmanrong

我也想知道，大侠，高手在哪儿啊？

晴斗斗

还没做到这一步，前几步问题就很多

三木一叶

有10％就知足吧，哈哈，我是转进去，一点迹象都没有呢

tlms1991

感觉是腺病毒滴度不够。腺病毒是瞬时转染，我的理解是转进细胞后目的基因不会随细胞传代，所以病毒数量要足。