plat-E细胞的转染试剂

zhangtang

我想问一下培养plat-E细胞进行抗性筛选的Blasticidn S and Puromycin，大家是买现成的呢还是自己配的呢？ 还有转染plat-E细胞进行转染时用哪种转染试剂比较好呢？Lip200,Fugene6还是LipLTX，希望得到大家的尽快回复哈，谢谢！

ljzmy82

钙转就不错，而且价格便宜

zhangtang

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你是指磷酸钙法嘛？那这个液体自己配还是买现成的呢？
5 G! C* d. F! o2 F  ^5 C

zhangtang

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6 B- p# K0 J- F0 z7 E/ I& u  Y# z3 t5 Y( `; Z/ D. a1 w
呵呵，我错了，刚才百度了一下，是一个试剂盒/ }# E/ A# c. j( H

关文静

lip ltx

echowdk

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! f! [+ T6 [+ o& U/ V8 I6 D+ h5 F1 v; p
你说的这两个药，在我们实验室都是自己配置。# X) ?- v( J" S, v# ?6 u
我们实验室用Fugene比较多。

Yedan

FuGENE，Roche已经停产了，如果刚开始做实验就别用FuGENE了，据说是Roche把生产线卖给了Promega，但是Promega巨坑无比，原本1ml/3000以内的FuGENE HD，Promega要卖5600，真的是要多黑有多黑啊。* _( ?# ?& Q+ N# S- B0 H
Plat-E本身就是293T来的，比较好转染，Ca、Lipo2000、FuGENE HD（或者6）以及Roche新出的XtremeGENE HP，这些试剂我都用过转Plat-E，效率都很高（P.S.铺细胞的密度不太一样），具体怎么用看你们实验室的具体情况吧。

zhangtang

回复 Yedan 的帖子4 {$ }8 y( {4 F) d
; e. h8 ]0 S6 \0 ~+ U- \+ Z+ K
好的，谢谢哈

zhangtang

回复 echowdk 的帖子, F- t: C5 O6 g  Z6 O& s. J
) D( Y$ i; p( W6 [# V
好的，谢谢哈

不倒翁

lipo 和 Cacl2我们都常用 最常用的是氯化钙 自己配的 一般没有问题有 那两个药是自己买来配 1000X的 puro也可以配成5000X的 blasticidin 巨难用无比 处理后细胞状态极差 基本筛选不出来阳性克隆 puro用的比较多 但是这个药反应较慢 所以千万别等对照死光了再停药 死到一半停药 细胞会继续死