求助：诱导胚胎干细胞突变

yylhxylong

想请教一下各位：8 t; c+ \; u3 g
       在使用小分子诱导胚胎干细胞突变的时候，是先加小分子，同时使用lif+2i media 来培养，在培养两天后是换成不加2i的meidia 还是一直使用lif+2i？

zpzp0312

只要ES细胞不是来源于难于培养的品系* [8 K8 O* m7 |7 _/ e- j
那么，2i的添加不是必须的？
/ ?" S9 R2 ^$ g$ p+ z9 z/ q) \另外，请教一下，2i是哪两个抑制剂？怎样溶解的，浓储液的浓度和使用终浓度分别是多少啊？7 \/ F% Z. N1 ~
请教

yylhxylong

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/ C9 j3 J! u; {7 y( O6 A
5 B6 Y$ a- m  O$ n4 o2i 就是CHIR99021（抑制GSK3）和PD0325901（抑制MAPK和FGFR），浓度的话貌似是1ug/ml 和 3ug/ml?

zpzp0312

回复 yylhxylong 的帖子) Y) \5 ]0 j+ r2 |

7 @& B* V3 F+ {8 t这两个抑制剂都是2mg的包装是吧？. w' w( G( a3 J
用多少DMSO溶解的，我忘记了