大家养的大鼠MSC怎样消化的？？？

signext

天山飞鹤 发表于 2012-1-4 08:42 ( d* I# @# |8 v* |9 x) j8 t
2.5%胰酶+EDTA，培养箱中消化2min, 前面两次因为细胞不纯，消化时间可以延长，后面随着细胞变纯，越来越容易 ...

! t5 R4 `5 j0 M7 Y+ X"前面两次因为细胞不纯，消化时间可以延长"
8 }" N6 w) z: n我的理解是 原代细胞因为帖壁更牢固，所以要多消化一段时间，我一般是4分钟
! U& h+ g5 t& A9 Y# k9 ^3 \而后面的不要消化超化两分钟，因为纯化MSC的方法就是靠传代，4 L7 d1 T% O6 m% x- a* t6 L
很难消化的那些都不是干细胞，消化嘛 意思意思就可以了 干细胞很好下来的

wangzhiqi86

0.25%胰酶+0.02%EDTA，如果单纯的只是传细胞，那看到细胞像沙状从培养瓶底部流下时，就可以加含有血清的培养基中止消化了

天山飞鹤

2.5%胰酶+EDTA，培养箱中消化2min, 前面两次因为细胞不纯，消化时间可以延长，后面随着细胞变纯，越来越容易消化，担心EDTA对细胞的影响，可以将胰酶稀释一倍但需延长消化时间