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bFGF的问题 [复制链接]

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包包
2011  
楼主
发表于 2012-1-7 23:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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求教:0 w6 c8 B/ e3 F  s1 o$ |
invitrogen的bFGF可否用invitrogen的D/F12培养基来配置。稀释后,分装冻存。
' L! m+ R/ u6 c3 T(10μg的,其实也配不了几瓶medium...)2 ^4 ^7 I& W% P2 [, w6 d
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沙发
发表于 2012-1-7 23:53 |只看该作者
补充:
1 `* y$ F. g% n7 s/ F9 F配制前,室温稍甩。' ~, {! M' J% w% j
主要是用买来液体的medium配,比较放心。
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藤椅
发表于 2012-1-8 06:19 |只看该作者
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0 i1 ]. {+ d- W9 r+ {: z# X, j8 c6 y( ?
你是用买来的粉加DMEM/F12 吗?
+ T3 s* L  N! g+ }0 E+ e我用的都需要加glycerol、BSA、DDT 和PBS配好后分装存在-20C.
" Z$ {- O- c0 F% x* T! \; X$ I放进DMEM/F12 我还没有见过这样做的--也许吧。建议你bFGF用新鲜的最好。
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金话筒 优秀版主

板凳
发表于 2012-1-8 09:38 |只看该作者
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7 b# c4 f9 V  L( v+ ~1 X. C' v" z2 i* V+ e9 Y$ o
我们是用10%的BSA来配置的 ,分装后,-20保存。
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报纸
发表于 2012-1-8 12:00 |只看该作者
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6 T" |4 A. b+ A, |$ b  c1 l0 u+ ]% R. `- C: p* J/ O( ]6 u: y. @0 q
不是powder,是liquid的DMEM/F12,就是为了不用过滤啊!7 N% P- {- T9 z) U5 b: G6 \
是的,我想加了后就分装冻了啊,然后就是用一支取一支啊! Y+ ~" G8 f- z7 B. D: E
只是不知道用DMEM/F12会不会影响bFGF。
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地板
发表于 2012-1-8 13:48 |只看该作者
PBS with 10%BSA 来配置的,分装后,-80 or -20保存,注意分装的浓度不要太低。
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发表于 2012-1-9 09:39 |只看该作者
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- I$ Z* i4 S3 b/ h- ]" x' c6 n7 G: s2 S) k- V6 H0 x5 p8 N
我通常配置到 100ng/uL9 \3 I! O2 |# e* ~
加50% glycerol, 25% BSA, DDT 和 pbs 之后分装到1.8的小管里存-20c几个月都没问题的。如果你把它保存在DMEM/F12中会很麻烦,DMEM/F12通常应该保存在4c。如果硬放在-20c的话,你每次用还得化冻,每次用的量也不一定相同,bFGF是不应该反复化冻的。
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8楼
发表于 2012-1-9 10:12 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子% @$ m, A1 s+ {+ l; y' I+ Q1 M
% T# r7 ?( s4 J& \2 I
各个公司的bFGF应该配置方法不太一样。因为购置的bFGF里面有不同的添加剂。
8 G$ x; E1 v1 X5 m0 H, A9 B比如盐分,BSA等等。 所以根据你购置产品推荐, 如果用水溶或者PBS缓冲液溶,你可以用培养基替代。9 y6 J3 C5 P0 {5 E
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9楼
发表于 2012-1-19 23:17 |只看该作者
我用Tris-HCL配的
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10楼
发表于 2012-1-20 00:45 |只看该作者
不是吧,应该是有专门的配置液,然后再加入到medium中,不然怎么消毒呐
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