干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 37277|回复: 10
go

bFGF的问题 [复制链接]

Rank: 2

积分
166 
威望
166  
包包
2011  
楼主
发表于 2012-1-7 23:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求教:
% @- f$ O' w, ?3 Hinvitrogen的bFGF可否用invitrogen的D/F12培养基来配置。稀释后,分装冻存。
9 n7 B# }# k* C0 ](10μg的,其实也配不了几瓶medium...)
; D! G6 d7 h0 A- ?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
166 
威望
166  
包包
2011  
沙发
发表于 2012-1-7 23:53 |只看该作者
补充:  S5 a! ~- n4 F3 U3 z2 I3 |
配制前,室温稍甩。
3 g7 S! q5 k0 `5 f+ f主要是用买来液体的medium配,比较放心。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
361 
威望
361  
包包
1970  

优秀会员

藤椅
发表于 2012-1-8 06:19 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子/ X& }/ |# b5 J! j) N
4 H3 y: n1 w3 ]: P" ]' |: d' V
你是用买来的粉加DMEM/F12 吗?
! j. l: I$ i( m! n我用的都需要加glycerol、BSA、DDT 和PBS配好后分装存在-20C.
9 t5 R4 z6 U0 s4 r5 ~放进DMEM/F12 我还没有见过这样做的--也许吧。建议你bFGF用新鲜的最好。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
947 
威望
947  
包包
3255  

金话筒 优秀版主

板凳
发表于 2012-1-8 09:38 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 白巧克力 的帖子* Y$ m# a3 T5 d4 t) Y

3 L/ P$ k  d, j0 `. w1 k) z) q我们是用10%的BSA来配置的 ,分装后,-20保存。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
166 
威望
166  
包包
2011  
报纸
发表于 2012-1-8 12:00 |只看该作者
回复 dianying 的帖子
9 @+ X" H) M; b2 |7 H
! c% [" o7 |/ \5 k0 U不是powder,是liquid的DMEM/F12,就是为了不用过滤啊!
  q  C1 |0 P4 e. ~% q3 t是的,我想加了后就分装冻了啊,然后就是用一支取一支啊
. M3 B3 W( P% d5 ?# \! p+ B4 B) A% ^只是不知道用DMEM/F12会不会影响bFGF。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
107 
威望
107  
包包
559  
地板
发表于 2012-1-8 13:48 |只看该作者
PBS with 10%BSA 来配置的,分装后,-80 or -20保存,注意分装的浓度不要太低。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
361 
威望
361  
包包
1970  

优秀会员

7
发表于 2012-1-9 09:39 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子" J$ e: Q; F+ Z" l- D" |3 R

: _% f) t4 n) h5 x( ~9 S' ]我通常配置到 100ng/uL
/ Y% p$ p. w* Z加50% glycerol, 25% BSA, DDT 和 pbs 之后分装到1.8的小管里存-20c几个月都没问题的。如果你把它保存在DMEM/F12中会很麻烦,DMEM/F12通常应该保存在4c。如果硬放在-20c的话,你每次用还得化冻,每次用的量也不一定相同,bFGF是不应该反复化冻的。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 4

积分
1322 
威望
1322  
包包
3387  

专家 优秀会员 金话筒

8
发表于 2012-1-9 10:12 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子
, {5 ?! N, k7 E1 n7 d+ U; y. p/ L2 j+ K) H/ M( Q
各个公司的bFGF应该配置方法不太一样。因为购置的bFGF里面有不同的添加剂。/ f. O, r6 `$ }
比如盐分,BSA等等。 所以根据你购置产品推荐, 如果用水溶或者PBS缓冲液溶,你可以用培养基替代。
& E. S+ @: i" f* F8 n. d. \! M9 B9 \
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1228 
威望
1228  
包包
1947  

优秀版主 金话筒 优秀会员

9
发表于 2012-1-19 23:17 |只看该作者
我用Tris-HCL配的
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
75 
威望
75  
包包
965  
10
发表于 2012-1-20 00:45 |只看该作者
不是吧,应该是有专门的配置液,然后再加入到medium中,不然怎么消毒呐
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-11-30 01:55

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.