bFGF的问题

白巧克力

求教：
) [3 U( Z# A+ n! L2 h! S8 @7 O8 `invitrogen的bFGF可否用invitrogen的D/F12培养基来配置。稀释后，分装冻存。5 \/ ^7 H$ {. f- c0 n& c7 ^
（10μg的，其实也配不了几瓶medium...）; }# n" Q5 {: t. i2 o/ @' R6 z

白巧克力

补充：
5 s+ p; V2 y. A$ K0 ?5 N% d0 Z配制前，室温稍甩。3 a# v* D8 }, T- z2 y
主要是用买来液体的medium配，比较放心。

dianying

回复 白巧克力 的帖子2 \" g, x8 N8 J3 r& q+ m4 t( U% c
9 A  N$ S* I+ v$ P
你是用买来的粉加DMEM/F12 吗？
6 C) s. V/ e" F# v% o! j, N) D  A我用的都需要加glycerol、BSA、DDT 和PBS配好后分装存在-20C.
1 Y. w, i% o/ F& A9 Y' ~放进DMEM/F12 我还没有见过这样做的--也许吧。建议你bFGF用新鲜的最好。

yangpan521

回复 白巧克力 的帖子
! o  l+ L, p& |. q: O8 o- G, `( ?) o, }8 n
我们是用10%的BSA来配置的 ，分装后，-20保存。

白巧克力

回复 dianying 的帖子
0 w& H5 L# W4 T2 S
) m4 X. L' {- `+ q+ t% S1 z, {, p1 |不是powder，是liquid的DMEM/F12，就是为了不用过滤啊！" u. G! i7 Z' k2 h5 N8 }: d, Z
是的，我想加了后就分装冻了啊，然后就是用一支取一支啊
; M1 M: w+ A/ q& b只是不知道用DMEM/F12会不会影响bFGF。

houbara

PBS with 10%BSA 来配置的，分装后，-80 or -20保存,注意分装的浓度不要太低。

dianying

回复 白巧克力 的帖子
' `0 k! N3 _8 _
6 H' w/ ~* k: K9 h我通常配置到 100ng/uL
9 P2 I) m8 [' F' G: m. l( ?加50% glycerol, 25% BSA, DDT 和 pbs 之后分装到1.8的小管里存-20c几个月都没问题的。如果你把它保存在DMEM/F12中会很麻烦,DMEM/F12通常应该保存在4c。如果硬放在-20c的话，你每次用还得化冻，每次用的量也不一定相同，bFGF是不应该反复化冻的。

meister

回复 白巧克力 的帖子& D9 Z: X* v8 ]8 V% y

3 u. o' a5 O2 h5 f/ h各个公司的bFGF应该配置方法不太一样。因为购置的bFGF里面有不同的添加剂。/ w" [* s( W9 m3 I4 N( }* j7 \
比如盐分，BSA等等。 所以根据你购置产品推荐， 如果用水溶或者PBS缓冲液溶，你可以用培养基替代。
+ J, M( e  B- h! i

zerollx

我用Tris-HCL配的

人在日本

不是吧，应该是有专门的配置液，然后再加入到medium中，不然怎么消毒呐