bFGF的问题

白巧克力

求教：; }' l) z9 p; Y, ~& o& g  y
invitrogen的bFGF可否用invitrogen的D/F12培养基来配置。稀释后，分装冻存。
5 C# O. n& r' }( H; c1 O（10μg的，其实也配不了几瓶medium...）9 C- _. Z+ K% S9 |9 ~0 I

白巧克力

补充：) x! X) D" ]! C+ l% C
配制前，室温稍甩。2 f* Z. b, T/ |" x5 U  O6 _
主要是用买来液体的medium配，比较放心。

dianying

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& z* R  i& N* y8 m5 |
7 F/ Z9 b) G3 R, W+ S你是用买来的粉加DMEM/F12 吗？
9 S/ W8 F0 N2 ?& c7 x我用的都需要加glycerol、BSA、DDT 和PBS配好后分装存在-20C.4 I. R+ w. @: S9 g4 M2 R
放进DMEM/F12 我还没有见过这样做的--也许吧。建议你bFGF用新鲜的最好。

yangpan521

回复 白巧克力 的帖子. D" \& B+ z  I( ]

$ @7 k- r7 K! {7 G我们是用10%的BSA来配置的 ，分装后，-20保存。

白巧克力

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; \5 y1 h7 P8 z3 m" L
+ D+ e, i2 X6 m! {' P% F不是powder，是liquid的DMEM/F12，就是为了不用过滤啊！: |0 _7 I2 L. P! _/ K* c! ]' [
是的，我想加了后就分装冻了啊，然后就是用一支取一支啊" x, G2 L. N: z! ?
只是不知道用DMEM/F12会不会影响bFGF。

houbara

PBS with 10%BSA 来配置的，分装后，-80 or -20保存,注意分装的浓度不要太低。

dianying

回复 白巧克力 的帖子* r# f1 E( D9 ^5 K6 z0 y; s
. M& P2 C" h  ?. g! ?- R  S7 X
我通常配置到 100ng/uL
2 `* R/ d1 [. N4 {) p加50% glycerol, 25% BSA, DDT 和 pbs 之后分装到1.8的小管里存-20c几个月都没问题的。如果你把它保存在DMEM/F12中会很麻烦,DMEM/F12通常应该保存在4c。如果硬放在-20c的话，你每次用还得化冻，每次用的量也不一定相同，bFGF是不应该反复化冻的。

meister

回复 白巧克力 的帖子6 X5 K+ |2 b& w0 V+ V: G( {4 v: g
/ _( B1 h! S- r
各个公司的bFGF应该配置方法不太一样。因为购置的bFGF里面有不同的添加剂。
7 S2 m' l7 d, R$ H/ T1 Q' ]比如盐分，BSA等等。 所以根据你购置产品推荐， 如果用水溶或者PBS缓冲液溶，你可以用培养基替代。1 @/ e2 E7 y, {6 X; G/ o6 f

zerollx

我用Tris-HCL配的

人在日本

不是吧，应该是有专门的配置液，然后再加入到medium中，不然怎么消毒呐