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bFGF的问题 [复制链接]

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包包
2011  
楼主
发表于 2012-1-7 23:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求教:7 t2 j% v& I0 b
invitrogen的bFGF可否用invitrogen的D/F12培养基来配置。稀释后,分装冻存。- {9 O- n7 r& C9 B  u5 L; J
(10μg的,其实也配不了几瓶medium...)/ J2 x$ ?! H% i) \( V1 J6 h
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包包
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沙发
发表于 2012-1-7 23:53 |只看该作者
补充:8 n% h5 w6 W8 ~
配制前,室温稍甩。7 e6 e4 ^+ V! J
主要是用买来液体的medium配,比较放心。
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包包
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藤椅
发表于 2012-1-8 06:19 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子" e6 P: g, ?  j  Q. x: [" t* S
* N7 T) `8 t* o. y0 ~, Z; s
你是用买来的粉加DMEM/F12 吗?
  y) U7 D6 U( {! q8 v4 T我用的都需要加glycerol、BSA、DDT 和PBS配好后分装存在-20C.
9 t$ u$ a1 {5 E7 D& d! t9 l7 D* H. z放进DMEM/F12 我还没有见过这样做的--也许吧。建议你bFGF用新鲜的最好。
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金话筒 优秀版主

板凳
发表于 2012-1-8 09:38 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 白巧克力 的帖子
/ f9 O, }. J3 T9 h/ _2 S
4 c& r! o6 f: O2 H5 m我们是用10%的BSA来配置的 ,分装后,-20保存。
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包包
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报纸
发表于 2012-1-8 12:00 |只看该作者
回复 dianying 的帖子( S$ M/ c8 L. h! Y! ^" H7 V
  h! H  I% L0 z" x, I8 L
不是powder,是liquid的DMEM/F12,就是为了不用过滤啊!' E; y; A: F* q+ E' B& `
是的,我想加了后就分装冻了啊,然后就是用一支取一支啊5 k# U% a! V! ~" _
只是不知道用DMEM/F12会不会影响bFGF。
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地板
发表于 2012-1-8 13:48 |只看该作者
PBS with 10%BSA 来配置的,分装后,-80 or -20保存,注意分装的浓度不要太低。
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发表于 2012-1-9 09:39 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子4 Z; E1 |0 z! s! B
5 f. u* W0 r4 Y1 t3 \% |
我通常配置到 100ng/uL
, \! ]/ E& p* A" F9 y, X- f9 i4 t加50% glycerol, 25% BSA, DDT 和 pbs 之后分装到1.8的小管里存-20c几个月都没问题的。如果你把它保存在DMEM/F12中会很麻烦,DMEM/F12通常应该保存在4c。如果硬放在-20c的话,你每次用还得化冻,每次用的量也不一定相同,bFGF是不应该反复化冻的。
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发表于 2012-1-9 10:12 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子
) R- s: ?( o  D' _2 j! `! }4 ^; t, l2 s# R  A
各个公司的bFGF应该配置方法不太一样。因为购置的bFGF里面有不同的添加剂。+ w/ C9 ?" a! Y2 D3 Y! ?$ Y
比如盐分,BSA等等。 所以根据你购置产品推荐, 如果用水溶或者PBS缓冲液溶,你可以用培养基替代。) {: e$ F- i* p. L% X
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发表于 2012-1-19 23:17 |只看该作者
我用Tris-HCL配的
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发表于 2012-1-20 00:45 |只看该作者
不是吧,应该是有专门的配置液,然后再加入到medium中,不然怎么消毒呐
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