几个关于全骨髓法培养MSC的细节问题

zarecol

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如果已经形成的话加肝素就没用了，不过如果你取完骨髓有操作时间比较长的话，可以考虑加一点进你的PBS和培养液中，对细胞培养没什么影响的。

细胞海洋

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sothiskk

回复zarecol : 谢谢，是大鼠。大团块有可能是血栓，但是在冲骨髓之前就已经就形成了的，可能和我操作不太熟练，离体时间比较长有关。不知道您说的抗凝处理指什么，但我觉得这种情况加肝素应该没什么用吧。

sothiskk

感谢各位的热心帮助，原来大家都是早上出来活动...

yyyan126

全骨髓培养法是这样的，第二天会变得比较黄比较浑浊的，但不是污染，是正常的，通过换液就可以了。

zarecol

从你的步骤来看，你养的MSC是动物源的吧？用的是全骨髓培养法吧？
1 w6 m1 t6 h; m( I! m; f: J' q; c首先，全骨髓原代培养的话杂细胞是比较多的，而且加上大量的血细胞，接种后发现培养液不澄清是正常的，但也不会像染菌那样，因为毕竟PH不会有太大的变化，如果你所用的培养液中加入了指示剂的话，你会发现培养液浑浊，但是颜色基本没变化。而且井下观察培养液依然澄清，只是有大量的悬浮细胞，首次换液后就会变回澄清了。
' n. `1 k# E" Y/ L* H3 U5 D2 t其次，你所描述的大的团块是不是血栓呢？如果是的话，你可以考虑把你所用的PBS和培养液做抗凝处理，不过，即使不处理影响不是很大。细胞依然可以生长。但过多的血细胞会消耗培养基中的营养成分，所以，要及时换液。  w" _: b" B1 t( I+ s8 c
再次，贴壁的圆形细胞是正常的，是骨髓中的杂细胞，随着培养的换液和传代会慢慢消除不必担心。4 C7 a! v: `: Y4 b, R
个人观点，仅供参考。希望对你有所帮助！

signext

问题不山寨，很实在
4 p: B, t3 z! H! H7 J. h1.过滤 大的组织块还是要去除的: G# I6 z% v: f+ d' G& ?! ^) J0 X
2 首换液前杂细胞多 死细胞也多 是比较浑 没事的 8 |9 H& g6 l1 H& [4 n) R* V. K
3 好的话传代后吧