胚胎干细胞传代的密度怎么掌握呢，纠结

ziluo11

最近养细胞，出现的问题很多，之前传代的时候总问师兄是不是可以传了，传几个平皿，或者滴几滴细胞悬液，问师兄怎么掌握总说看情况，这个情况不好掌握啊，我自己传代，不是稀了就是密了，有时一个视野很多，换个视野一个都没有，我真是头大了，哪位指点一下，谢谢啦！

xiongjiedeng

关键看你的用途或者实验安排吧~~密度一般不是问题，大了就传代勤快一点，小了就多养几天嘛~~

jianghaixiang

传代细胞可根据具体情况分装的，如果等着急用，接种时可以接多点，如果不急着用的话就可以接少点，这个密度可以在显微镜下观察来掌控。一般情况下，可以将预计的培养基全部加到已弃上清的离心管内重悬细胞后再分装，这样可以均匀分布于整个培养瓶内生长，不至于出现有的视野细胞多而有的视野没细胞的情况。

salomemao

我一般都一传4，密度还可以，上面说的对，关键是摇匀

sino85196488

密度是一方面，但是最重要的还是要摇匀，传代后板子放到培养箱后，不要再碰板子或者皿，开关培养箱时也尽量要轻。

lhw7514093

细胞看你要求，想长的快点就多铺一点，想长的慢就少铺点，也看你的细胞活力，每一株都不一样，而且一定要晃匀了，要不肯定是一片密一片疏的。

song58

关键在于摇匀...
3 t) F: k! f$ A' L$ e6 o9 X孔越小越难摇匀

sarah19860420

回复 冰枫de梦 的帖子7 u$ {: T( _$ h% z0 q% O

# `5 _6 O: I) o$ J. k% Y* N1 `一般只要数量级没有错，就差不多的

dongxin

6 ~  ~9 T/ q0 W2 i
5 j. C' {/ w) K6 a
既然看情况掌握不好，那就计数吧，细胞密度在5*10^6应该就可以，但是请注意每次传代时要将细胞铺匀，这样下次看时就不会一处多，一处没有了，祝好运！! |( A) A) \0 H" _" c, }

冰枫de梦

% ~9 D/ z' Y2 x/ P7 B
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回复 sarah19860420 的帖子
3 v- @$ j" w4 r3 S; A
3 a8 Y- j1 |" r) e1 Z: u- m9 S记数有时不怎么准，同一批细胞的几次记数有时差距都会很大，呵呵。所以记数时最好多记几次