胚胎干细胞传代的密度怎么掌握呢，纠结

ziluo11

最近养细胞，出现的问题很多，之前传代的时候总问师兄是不是可以传了，传几个平皿，或者滴几滴细胞悬液，问师兄怎么掌握总说看情况，这个情况不好掌握啊，我自己传代，不是稀了就是密了，有时一个视野很多，换个视野一个都没有，我真是头大了，哪位指点一下，谢谢啦！

l19rna

细胞计数啊，有时候看你实验要求铺多铺少吧
+ I; H; d" e2 |* n. S# h/ y$ O$ g4 S/ P6 D( |% j* U3 K
mESC普通传代的话，我是这样的
* c$ @: T) g( G# U/ F10cm  ~5*10^6) }$ n" R' z4 d8 n" T
6cm   2-2.5*10^6

冰枫de梦

我一般都是1:2或1:3传代，1:2细胞长的更快些。细胞密度没怎么管过，呵呵。

sarah19860420

计数才是王道

luoziwei

据文献说，5000个每平方厘米，仅供参考。

wujunyu

我一般是1-2*10^4每平方厘米

冰枫de梦

/ I; n6 t: p% e: D/ S

1 p- e; G2 R. G3 `% f) Y回复 sarah19860420 的帖子
/ A" T( `( n+ ]1 l( e4 u+ X2 I+ I% J- N5 ?' l0 n% h
记数有时不怎么准，同一批细胞的几次记数有时差距都会很大，呵呵。所以记数时最好多记几次

dongxin

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2 t! K) _) X/ k) C7 E3 E既然看情况掌握不好，那就计数吧，细胞密度在5*10^6应该就可以，但是请注意每次传代时要将细胞铺匀，这样下次看时就不会一处多，一处没有了，祝好运！! M3 `: H, g7 L$ i$ i# {

sarah19860420

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, i) |( R3 U; [7 K5 v: K9 [+ l) g
3 O; I5 X$ M: r9 _7 K/ t一般只要数量级没有错，就差不多的

song58

关键在于摇匀...- |, U0 ]6 G  H. T$ ?# Z- v
孔越小越难摇匀