做一次流式所需要的细胞量是多少

lingminliang

做一次流式所需要的细胞量大概是多少？12孔板的一个孔的量够吗？

zerollx

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做流式一般要求细胞的浓度为10的6次方~10的7次方，太少上样过慢，太多则上样过快，均会影响实验结果，有时为了调试仪器，可能消耗的悬液较多，多以每个样至少得用500ul的液体重悬，故一个样至少需要50万细胞，12孔板你得看你养的是什么细胞了，像淋巴细胞或293T也许问题不大，若是成纤维细胞肯定是不够的了……

zzc2211

首先明确你流式细胞做什么？流式细胞可做很多东西，但核心就是细胞分选计数，因此细胞的处理很重要，既不能细胞粘连成块，也不能细胞成碎片。如你有500万细胞，但处理不好大部分都损失了，测的很慢。处理好的细胞一般100万足够，二楼说的最少50万是恰当的。12孔板一孔肯定不够，不建议这样做。考虑到损失，新手建议用6cm dish做。

evial

那看你要测的细胞比例多少，你说的是流式分析吧，有时用来设门都可以花掉万把个细胞，一般10的5次方也行。如果是分选细胞比例少的话分出来才几个放进板里找都找不到呀。

lingminliang

那我做一次流式能同时测出细胞的生长曲线 细胞周期以及细胞的一种表面标记物吗 还是分别做？

细胞海洋

  Z+ d# A/ S/ D3 Y$ S
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像我回复你的帖子这样

vivicat

回复 lingminliang 的帖子" \! z' j  {! N" n

2 U# S* ?) n' q7 `( {细胞的生长曲线是？我做过表面标记和周期一起做的

lingminliang

回复 细胞海洋 的帖子$ v! G+ U% \7 [) P
+ l. C" K/ Y9 Z8 @3 H' u0 o5 _
哦 明白了 谢谢赐教

haibara007007

楼上的高手已解答很详细，记得细胞浓度和你的细胞类别来确定用量

namulow

回复 zerollx 的帖子' B& R" G5 }$ \+ H

. K. J# c4 [: e" v老师，请教个问题，我没做过流式分析，现在准备把兔子的脂肪干细胞做个流式分析，现在准备买抗体，但是兔子的单抗很难买到啊，做流式分析的话，抗体都有严格的种属区分么，用鼠的单抗可以么？我是小白。。。。