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请教小鼠胚胎干细胞如何形成EB? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-2-10 21:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
有没有做过的前辈,能不能介绍一下步骤啊?
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沙发
发表于 2012-2-11 04:50 |只看该作者
回复 meiying3061 的帖子
- ~. A9 m: N9 d
# ~* v9 n; n( k$ |, l* i6 nProtocol网上都有很多。关键是找一个适合你所在的实验室的。
5 c6 Q) R# u7 ]5 c; a
# ^9 \% y% D4 E6 s& z8 ?http://www.protocol-online.org/prot/Cell_Biology/Stem_Cells/Differentiation_of_Stem_Cell/Embryoid_Body__EB__Formation/index.html
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藤椅
发表于 2012-2-11 18:14 |只看该作者
两种主要方法1 F# u( q3 a% x$ ~. [, R8 y% h# S
悬浮   在细菌培养皿上培养(无吸附性)4 b3 z+ J3 n% t- G3 }4 t
悬滴    在培养皿中倒点PBS,保持皿内不干。在培养皿上盖上,20uL-30uL一滴的细胞培养液,2天左右就可以看到EB形成。但是要求FEEDER CELL除的很干净。这种方法速度快而且形成的EB形态一致
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板凳
发表于 2012-2-12 20:24 |只看该作者
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悬浮法:将mESC按照1000 cell/ml的浓度接种到100mm的petri dish中,共加10ml培养基。每隔2-3天换液,换液时将培养基收集到15ml离心管中,在培养箱中静置15min令EB沉降下来,然后丢到上面的9ml培养基,用新鲜培养基将EB重新接种到100mm的petri dish中继续培养。
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