细胞复苏率很低是怎么回事啊？

准姿梅影

我们实验室一般采用10%FBS+90%DMSO，现用现配，配好后立即加入细胞中，迅速放到程序冷冻盒，-80℃过夜，第二天放到液氮里。解冻时要从液氮迅速转移到37℃水浴，晃动冻存管，确保液体在90s内融化，，随后加5ml含10%FBS细胞培养液，离心后，马上去上清。动作尽量快，减少DMSO对细胞的损伤。如果没有程序冷冻盒，就用多层棉花包裹冻存管，-20℃放2h,-80℃过夜，液氮长期保存。