ES培养基的成分及配制

huangcong1988

最近准备配human ES 培养基，但是看了文献之后觉得头大了，因为不同文献使用的配方很大不同，所以想请教各位战友，human ES的培养基的成分，配制需要注意哪些事项，有没有使用起来很好的human ES培养基？谢谢大家

zhusealin

我们用的配方是 80% DMEM/F12   20% SR    1% NEAA    0.5% 谷氨酰胺  4ng/ml bFGF   0.1mM beta巯基乙醇

lixf

我们用的配方是 79% KODMEM   20% SR    1% NEAA    1% 谷氨酰胺  8ng/ml bFGF   0.1mM β-巯基乙醇

song58

回复 huangcong1988 的帖子9 o: F' o- b) I' w5 M

/ m6 Y  L% W. ?  \/ I! `KSR                                              Invitrogen        100 ml9 E3 F. {6 w- h* N* m8 l# p5 Q, U' F
Non-Essential Amino Acids              TMS-001-C         5 ml/ _6 J' d/ r" d5 ^
L-Glutamine Solution               TMS-002-C         5 ml
2 X  K8 U" M3 a+ x( P3 LBeta 2-Mercaptoethanol               ES-007-E        5 ml. u0 ]! v5 Q" v" P4 @
Penicillin-Streptomycin (optional )    TMS-AB2-C         5 ml0 u0 a; O2 ^6 D+ ]3 n
Fibroblast Growth Factor basic,
+ T, i  Y' {9 N2 g human recombinant              GF003        4 ng/ml
" t7 M) W6 s, p" m" V3 E* H# uEmbryoMax® DMEM/F12              DF-042-B        Add to 500ml
& a- E5 S4 ~3 p* k
1 H, _4 d8 a9 m我用的配方，仅供参考
; @' Z% L$ Q" M& H- t7 K

huangcong1988

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$ r, F3 R1 Y, g% x7 E0 o! r9 K
4 J' w+ N5 B4 W2 n* O) h7 d谢谢，我看大家配方中主要是FGF含量不同，这个影响大么？

huangcong1988

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! X3 x2 X$ J' v* s5 j( h% G$ F
2 m9 N/ }. j& m, ^6 D# v) J1 U谢谢，那这些成分分别怎么保存呢？

huangcong1988

回复 lixf 的帖子- t1 i* z, e1 y: g% `

2 z. J( s7 ^$ T4 m谢谢，那β-巯基乙醇用过滤么？它会溶解滤器么?它是有机溶剂?

huangcong1988

回复 song58 的帖子1 f* K) C" {7 I4 q# X# C
9 C, g" `5 v: b/ ]# k+ c
还有，问你一个问题，就是之前丝裂霉素c加PBS配了之后，颜色是淡紫色，这个正常吗？

song58

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5 E; o2 A7 ^; `9 I$ ^
1 \  e, ?! a& V& W保存的话，每个产品包装上都有注明。% H4 ^: N$ E& E% [/ _  Y, T, i+ C
MC应该是不用PBS溶解吧，我用培养基（10%FBS的DMEM）溶，这东西需要避光保存，新鲜配的发点紫红色，比DMEM颜色深点

lixf

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( [: M5 e3 z/ ?; n$ a3 ~4 {, `3 t: o6 A. }$ l- S. K% @
稀释、过滤，我们过滤的时候也没见它溶解滤器呀。是有机溶剂