ES培养基的成分及配制

huangcong1988

最近准备配human ES 培养基，但是看了文献之后觉得头大了，因为不同文献使用的配方很大不同，所以想请教各位战友，human ES的培养基的成分，配制需要注意哪些事项，有没有使用起来很好的human ES培养基？谢谢大家

zhusealin

我们用的配方是 80% DMEM/F12   20% SR    1% NEAA    0.5% 谷氨酰胺  4ng/ml bFGF   0.1mM beta巯基乙醇

lixf

我们用的配方是 79% KODMEM   20% SR    1% NEAA    1% 谷氨酰胺  8ng/ml bFGF   0.1mM β-巯基乙醇

song58

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- u! r$ z! w" z8 n
: ?, i3 q' j4 QKSR                                              Invitrogen        100 ml( b6 H* z8 T  h/ @# Y% o0 W
Non-Essential Amino Acids              TMS-001-C         5 ml' o4 y2 V1 U) F- @7 R5 }
L-Glutamine Solution               TMS-002-C         5 ml: C! u3 ^- ?1 U2 \8 Y, C# n
Beta 2-Mercaptoethanol               ES-007-E        5 ml* M! W) ?* v, W3 o; H' c
Penicillin-Streptomycin (optional )    TMS-AB2-C         5 ml
" y2 L0 F8 e; G+ b" FFibroblast Growth Factor basic,
* \( B( ~& a" u$ w" P& h human recombinant              GF003        4 ng/ml
* @4 Z* f3 z1 N6 TEmbryoMax® DMEM/F12              DF-042-B        Add to 500ml  I8 d/ D) T( m# T
2 g  J5 P3 {8 z, ~/ I2 J5 b* w: z% j
我用的配方，仅供参考
( b  n2 C6 J& X9 w7 U" Z

huangcong1988

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4 k: ^: w. q4 y  V+ e/ f/ {# o* m- ~+ S) b0 {8 B6 D/ c) V
谢谢，我看大家配方中主要是FGF含量不同，这个影响大么？

huangcong1988

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: j6 T( z( Y, b  v& h( ~' c9 R' X0 v9 W3 u/ `
谢谢，那这些成分分别怎么保存呢？

huangcong1988

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  d) |0 u( E8 ~: ?2 f4 Y! J) ?7 P( [4 @( }) D' H
谢谢，那β-巯基乙醇用过滤么？它会溶解滤器么?它是有机溶剂?

huangcong1988

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% J' ?# m' k. r3 u* K
& C7 F8 w7 W; F6 [. |3 V还有，问你一个问题，就是之前丝裂霉素c加PBS配了之后，颜色是淡紫色，这个正常吗？

song58

回复 huangcong1988 的帖子- @; }: f$ ^8 \% x& {: k
0 n1 G& H3 Z& |6 X' g
保存的话，每个产品包装上都有注明。
  p' t! p& `2 V/ s& m5 gMC应该是不用PBS溶解吧，我用培养基（10%FBS的DMEM）溶，这东西需要避光保存，新鲜配的发点紫红色，比DMEM颜色深点

lixf

回复 huangcong1988 的帖子. i# @/ [& m8 d2 I6 ^1 Q  L

1 y- y4 d/ s" }! D稀释、过滤，我们过滤的时候也没见它溶解滤器呀。是有机溶剂