关于胰酶消化细胞

wuyannini

我也补充一点，就是在倾去培养基之后，用PBS清洗一定要充分，一般2-3次，如果残留有血清成分则不利于消化。我的经验

xiaoqi

补充一下：如果你感觉没有消化下来的细胞比较多的话，可以再加少许胰酶作用一下，这样就比较充分了。

大少爷

显微镜下观察一下嘛

safflower

以下几点可能需要注意：; d! p2 _: t' H9 V1 s; T
1.一定要让胰酶均匀分布在整个培养板/瓶中，可以轻轻晃动使其均匀平铺于整个细胞层面；
3 z" c+ h+ e$ z+ [  T) y2.加胰酶后，一定要在显微镜下观察，看到细胞回缩变圆，少许细胞漂起时，立即终止消化。* Z8 b' ~( k1 z5 G+ l
3.吹打制成悬液时要轻柔，尽量不产生气泡，因为气泡破裂时产生的冲击力很大，可将消化后的细胞破碎；) `/ R5 ~! ~) H& f6 }* m
4.另外吹打的时候每个部位要到位。
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xiongjiedeng

从4℃出来要在37℃预热半个小时，效果会好很多；然后得看你的细胞了，不同的细胞对胰酶的反应不一样，还有细胞的密度也有关系，所以楼主要慢慢摸索，总结经验。我一般是用2ml的胰酶，消化2—3min足够了

lingminliang

胰酶的消化能力并不是一定的，不同的批次对不同的细胞的消化能力也不同，而且新配置的酶的消化能力较强，随着使用时间的延长，消化能力就降低。