请教：终止胰酶消化作用的办法 - 间充质干细胞专区干细胞之家



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上帝帮我转运吧

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楼主

发表于 2012-3-12 22:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

大家好，一般用血清终止胰酶消化，如果用无血清培养，该用什么终止消化呢？知道有一种胰酶替代物可以不用终止，但是相比好贵啊。不知道能够抑制胰酶作用的东西都有哪些？在这里先谢谢各位的回答了。

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沙发

发表于 2012-3-12 22:58 |只看该作者

soybean inhibitor,不过价格比accutase还贵，如果我没记错了的话

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aulenuyah

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藤椅

发表于 2012-3-13 01:06 |只看该作者

你可以在消化结束的时候轻轻吸弃胰酶，不要吹打和加液体，吸干胰酶之后，再加培养液吹打，离心清洗几次之后就可以了。我们实验室有人这么做，感觉还可以。

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hany2007

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板凳

发表于 2012-3-13 05:48 |只看该作者

我们这里条件有限，我从来没有用过终止液，用pbs重悬离心就可以了

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新疆八钢

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报纸

发表于 2012-3-13 08:52 |只看该作者

回复上帝帮我转运吧的帖子. ~/ B( ^' d4 g4 v) z, k" {
9 U* m6 @+ Y8 V6 c5 ` m
你如果没有专门的终止液，要严格掌握消化时间，在细胞被消化到球形还没有完全离开培养瓶底部壁的时候，小心吸走胰酶，加入无血清培养基吹打细胞成悬液，转移入离心管，离心反复冲洗2次，再接种。操作时，一定要注意动作轻柔，避免过多损伤细胞。