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请教:终止胰酶消化作用的办法   [复制链接]

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包包
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发表于 2012-3-13 10:38 |只看该作者
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回复 不倒翁 的帖子
5 S( t/ \) [4 t# W4 O" T
* i2 O+ C2 T2 ^0 N& b4 O谢谢,这就放心了

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发表于 2012-3-13 10:40 |只看该作者
回复 quit6927 的帖子( h+ v8 x) ~* P: J' U

4 g2 I$ I9 o7 u! b% [5 m* h哦,呵呵,那我就是被唬了。如果别的办法不行,就试试买这个产品。请问您用过吗,型号能说说,要是价格也提提更好了

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发表于 2012-3-13 10:46 |只看该作者
回复 南宫燚岚 的帖子
7 w) N1 o/ S( I+ B/ A( s- u* M/ `: o4 C; L* U! Q
我想,胰酶浓度我是不是有必要小一点,如0.05%~0.125%,因为我加入0.25%的后,如果是细胞长的时间不长的话,从超净台拿到显微镜下甚至都有少部分细胞掉下来了。
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发表于 2012-3-13 14:50 |只看该作者
我们还是用胰酶消化,血清终止。完了用PBS或无血清培养基洗细胞2—3次,再以无血清培养就可以了。我一直是这么传代神经干细胞的。不影响它的分化。
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发表于 2012-3-13 17:10 |只看该作者
回复 safflower 的帖子
( N1 G6 Q) b! A: F' j/ p) f2 r$ A0 S: s' ^& Z4 I0 D
谢谢哈,学习了

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发表于 2012-3-13 17:12 |只看该作者
回复 jessewill 的帖子
: w! r  D! \/ z$ K, s$ c; L, {" A4 e& [
谢谢推荐一个新的产品。

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金话筒 帅哥研究员 优秀版主 小小研究员 热心会员 积极份子

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发表于 2012-3-13 21:12 |只看该作者
如果楼主是要求整个过程无血清培养的话 那么消化过程可以用多一些的培养基或者PBS稀释,(可以用你的旧培养基哦 所谓无血清其实很多都含有蛋白成分的) 然后离心 弃去上清 用新鲜培养基重悬种植 问题不大
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发表于 2012-3-13 22:57 |只看该作者
楼主闲麻烦的话,就用TrypLE吧,消化结束后,加2-3倍体积的培液,把细胞吹散,离心就OK了。TrypLE也不贵
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发表于 2012-3-13 23:13 |只看该作者
有些无血清培养基可以当作中止液使用,可能是添加了胰蛋白酶抑制剂或加了蛋白。) F$ f4 W3 o* \% l. g5 l: W
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发表于 2012-3-14 09:57 |只看该作者
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9 }+ P. b8 J5 Z3 S" S, t" n& I( r3 b) b% w( y- L* h
哈哈,用旧培养基我喜欢。是不是先离心一下比较好些。在时间充足的话。
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