求教！关于小鼠iPS培养基配方的问题！

ligangtiancai

RT，小弟在培养miPS中发现视野中细胞碎片较多，且在传代后3天内就有大量的分化，不知道是配方的问题还是MEF的问题。小弟培养基配方是：高糖DMEM210ml（Hyclone）+FBS 25ml（Hyclone）+NEAA 2.5ml +L-Glu 2.5ml+2-ME 0.25ml+LIF 1000U/ml MEF是自己分的昆明鼠。$ |: X1 K( i) w( h. U
请教高人：( Y5 j- j8 g' _- P* F
1.有成功经验的培养基配方 4 M: ?: d  t, s, k
2.胰酶的选择（是否+EDTA？牌子？）
$ z7 d0 W! H/ c  r0 Q% |# F! W3.传代周期？
3 D5 n: N. W7 j7 w! i! E2 x4.MEF的选择？（KM MEF是否可以）. X& m/ v) H( H+ l) w
5.求几张不错的miPS的图片参考一下。2 t& [% g' D8 }
        感激不尽，先行谢过！

ligangtiancai

求教高人啊！

ligangtiancai

回复 mohanmud 的帖子3 ?* G$ E& |  Z0 D7 n) f
! z% c1 \3 O/ N9 g4 Q6 v# A3 \1 i2 Z
谢谢，不过文献上miPSC不是多数用的是C57的MEF么？CF-1的是不是多用于人？再就是这里的ES qualified FBS和我所用的Hyclone FBS相比优势在哪、、因为我刚买了500ml的血清，不知是不是就不能用了 必须用ES qualified的，望不吝赐教，谢谢！

ligangtiancai

回复 mohanmud 的帖子
6 J1 {8 n) u! [4 s$ p4 r/ Q0 v9 ~4 E2 m, I+ B( _- Q' h
好的  谢谢！再就是请问一下LIF能否直接加到配好的培养基中，我现在是每次换液的时候现加的，老师说是长时间加在培养基中LIF效价会降低，不知你是否有这方面经验，谢谢！

ligangtiancai

LIF直接加到培养基中？不用每次换液都再加么？还有  不好意思请问2i体系是什么。。谢谢！

ligangtiancai

回复 抹了个茶 的帖子
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6 A! r  {8 h) I, d6 s就是说2i体系是LIF+erk和GSK pathway的inhibitor？这种效果和fbs+lif相比如何啊？谢谢！