Western细胞裂解液的裂解效果与蛋白保存问题

runsong

我们做western使用的裂解液主要成分为20mM Tris(pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，冰上将细胞吹散并裂解30分钟，之后12000转离心并弃上清，-20度保存。但此蛋白样品在保存过程中会有絮状物生成，严重影响蛋白浓度测定与使用。不知大家有没有遇到过此类情况，是何原因，如何解决？

runsong

回复 zxcv12345 的帖子/ u4 W$ X6 {+ Y: O2 z
( {+ F  e/ ^) Z
谢谢。还有几个问题。# P- \' U) R: n4 ?7 V7 e; X1 L
1、你们用的浓度大概多高啊，我一般是大约20微克每微升？: d) v8 u3 _: V9 |
2、形成沉淀与残留的DNA有无关系？
: h$ o5 R  R9 L/ N  U3、我所用的裂解液有改进的必要吗？9 s; c% Y: T1 N/ d