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[请教] Western细胞裂解液的裂解效果与蛋白保存问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2012-3-22 17:28 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
36包包
我们做western使用的裂解液主要成分为20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,冰上将细胞吹散并裂解30分钟,之后12000转离心并弃上清,-20度保存。但此蛋白样品在保存过程中会有絮状物生成,严重影响蛋白浓度测定与使用。不知大家有没有遇到过此类情况,是何原因,如何解决?
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沙发
发表于 2012-3-22 21:56 |显示全部帖子
回复 zxcv12345 的帖子/ u4 W$ X6 {+ Y: O2 z
( {+ F  e/ ^) Z
谢谢。还有几个问题。# P- \' U) R: n4 ?7 V7 e; X1 L
1、你们用的浓度大概多高啊,我一般是大约20微克每微升?: d) v8 u3 _: V9 |
2、形成沉淀与残留的DNA有无关系?
: h$ o5 R  R9 L/ N  U3、我所用的裂解液有改进的必要吗?9 s; c% Y: T1 N/ d
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