慢病毒感染细胞

huangcong1988

诱导iPS，病毒滴度测定后，要感染供体细胞了，但是不知道病毒颗粒与细胞数目的比例，文章中都没有提到说病毒颗粒与供体细胞比例，但是个人觉得病毒数目跟供体细胞数应该是一点比例的，不然就没有必要测定病毒滴度了，也没必要浓缩慢病毒了，所以想知道大家一般感染细胞的时候病毒与细胞数目比例是怎样的？怎么确定呢？

christophe

病毒滴度过低可能会导致ips形成不了或者效率低，但如果病毒滴度过高比如说MOI高于100，各位认为这样会对ips形成有什么影响啊？效率会反而降低吗？形成的ips会质量不会吗？
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$ ?% ~" g4 w% t  D3 Z补充内容 (2012-5-8 11:39):
8 a! Z0 A2 v0 v3 u  K: `1 y0 m最后一句打错了，是“形成的ips质量会不好吗？”

huangcong1988

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4 d# C. k8 O. n4 v9 f
/ r' a! |) m$ v; J/ t! V木有空载咋办呢？

huangcong1988

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是不是病毒数量有点少？

huangcong1988

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8 J3 h* \. t% m
2 l0 P5 d) y9 T; Z: K  c# b那估算的有参考意义么？那样空载带荧光，质粒不带，应该不能参考的，绝对定量测滴度，很麻烦

不倒翁

回复 huangcong1988 的帖子) F. D8 q2 E! b* D- S
1 [- F* T' N( F3 B. N1 J/ J" c
空载体也不带GFP么 我们一般是转一个空载体比如pMX-GFP做对照来估计转染效率的

不倒翁

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2 M: E3 ^& `& N# f. I1 Z
' S5 a& Q4 }1 S* h1 `6 `空载体也不带GFP么 我们一般是转一个空载体比如pMX-GFP做对照来估计转染效率的

cochongg

1:1一个细胞一个病毒

遗云射月

定量测病毒滴度怎么测？我用的载体也不带荧光，是用带荧光的空载体估算的

ouyi2738

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0 T7 }2 x$ m! t" p, h2 e* r+ K最早的几篇文章不都是这么做的么，以我的经验用这种方法小鼠的很容易得到ips。至于质量就看你经验和运气了，成千上万个克隆，只要你各因子的量差别不是特别大，肯定会有好克隆的。没有OG或OR的细胞系，挑克隆和鉴定确是很麻烦。