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楼主: 花饶然
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求助为什么我养出来的CIK细胞集落大部分贴在壁上啊,急!   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-4-29 09:59 |显示全部帖子
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我们培养的外周血CIK没有出现集落贴壁现象,我们的方法是:抽取外周血50ml,用ficoal分离并收集PBMC,因为是临床用的,我们都是用生理盐水冲洗的,然后以1 ×106 /ml密度,用GT-T551,加入IFN - γ1000u /ml, 24h后加入 IL - 2 1000u /ml, CD3 50ng/ml,CO2培养箱中常规条件培养,以后隔天计数换液同时补加rh IL - 2 1000u /ml,一般培养14d-18d,回输前两天做内毒素,真菌,支原体,细菌检测,流式做表型等,细胞总数一般能达到2.0.X1010,收集最好只离心一次,做个存活率,一般在90%左右,分四次回输。仅供参考,谢谢!
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