如何切割干细胞

我不是小龙虾

刚刚培养出胚胎干细胞,但是用巴斯德管拉的管子切割干细胞团时把饲养层也切下来了.而且切的很乱.把切下来的小团细胞放到新鲜的饲养层上时贴壁了.但都两天了还没长,好像死了.怎么回事啊?请问各位你们都是如何切割肝细胞团的啊?

scienese

我也遇到了同样的问题，期待大家的解答！！

frankieisme

直接用移液枪吸，1ml的枪带上枪头，再套上一个10ul的小枪头（小枪头套在大枪头的前面），把克隆吸到另一ep管or离心管，反复吹打，把细胞吹散，之后接种到FEEDER上就可以了。

lxm5668

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/ F% J' ~0 I( H5 A) M+ Z2 [7 B
! F; E5 G0 r9 W$ }靠谱！

我不是小龙虾

谢谢啦...可以告诉我一般需要吸多少液体在离心管里吗?最后是直接把管里的液体全放入一个孔吗?

frankieisme

一般是把所需要克隆吸完为止,液体量可自行调整,少了再加,多了可把离心管静止10-30min,细胞自行沉降,再移走多余培养液.祝顺利!

我不是小龙虾

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" W8 i' G$ U3 `& [, m2 x( w) x' ^恩恩...谢谢啦

cochongg

直接挑克隆，用10ul的移液器把细胞团吸出来。保证靠谱。( s( r3 E5 k1 [/ V
然后消化在接到板上啊

我不是小龙虾

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0 i2 F( k2 c5 v# L
# I) R8 B5 q1 }6 w- q恩....谢谢啦...但是我在用移液枪吸细胞团时,把饲养层也吸上来了...

cochongg

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5 ?1 @4 j' n1 S0 A/ N7 y9 w吸到feeder也没关系，/ U* T( Z- X1 b% ], Q
1，要求无菌，+ j' A: z8 e2 @: F! L" _! F
2，多挑几个团，7 \9 }4 R! w# b# p/ g