eBioscience CD3单抗配制

yanlu98

请问谁用过eBioscience CD3单抗 货号是14-0039，请问是用什么溶解的啊？

cochongg

用1xPBS溶解，单抗是球蛋白，有重链和轻链，两者靠二硫键连接，长期存放在4摄氏度二硫键打开，抗体就降解了。
2 ^2 y/ F6 I; \$ W2 @PBS能使抗体处于一个缓冲体系当中，相对于用DD水溶解要存放的旧。  c7 h1 ~3 C; i4 M9 B! D
溶解时要注意，溶解成高浓度母液，分装小管，-20摄氏度保存，用的时候解冻，最好一次用完，4摄氏度存放不要大于2周，略有降解，

yanlu98

回复 cochongg 的帖子. f+ F7 f: n7 x& ~
8 U4 ^0 b2 Q% V, g* r8 _9 O
请问我用细胞室用PBS可以吗？是KCL 0.2g，KH2PO4 0.2g，NACL 8.0g，NA2HPO4 2.16g配成1000ml，这种PBS可以吗？

yanlu98

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: q3 K7 k6 i) v( D7 _
3 n3 k" w: `" J+ R( l$ P) a知道了 谢谢！

cochongg

回复 yanlu98 的帖子* y- i! V% [9 [7 \1 S( p

: Y% F4 u) m4 Z, T/ M要无菌的pbs会好一点，最好是0.22um过滤啦~\(≧▽≦)/~啦啦啦& h1 W* p0 Y/ u/ O" u  u
1mg或者2mg溶解到1ml的pbs里面，50uL每管，分装20管。。。。。用的时候多方便啊
7 L- U' t* V( x8 `" F2 t" g2 P

dahui

eBioscience这个14-0039的全称是Anti-Human CD3 Purified，一共有两个包装25ug和100ug。但是出厂浓度都是0.5mg/ml，厂家推荐染色体系是：0.25ug/100ul/105E~10E8cell，但是厂家推荐的量一般都较大，因为他要保证你有充足的抗体可以与你的目标分子结合，所以他推荐的量一般不要超量，除非您的细胞量很大，体系很大。您问的这种情况，我不知道您是要稀释分装保存，还是正式试验过程中需要同时操作多个样品，而稀释抗体来染色，一般不建议对原厂的东西进行稀释保存，而是在试验过程中稀释成工作浓度来现配现用，用灭菌的PBS稀释就可以。

yanlu98

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& t5 I9 Y$ M, ^3 m. s7 C% q; c9 U" M* ~4 X
谢谢！

echono

cochongg兄：用1xPBS溶解，单抗是球蛋白，有重链和轻链，两者靠二硫键连接，长期存放在4摄氏度二硫键打开，抗体就降解了。PBS能使抗体处于一个缓冲体系当中，相对于用DD水溶解要存放的。
, d! s9 \5 e4 X; F8 p9 x6 M; P0 {4 d
对于这个原理按道理是没错，但有个疑问：为什么像那些市面上用的球蛋白反而要求4度保存，冻存后反而不能使用？太困惑了。不都是球蛋白

细胞海洋

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- v7 G! l: a: K" R2 @; U4 c% h/ n3 s) `3 G
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; v: o* S/ P: N* @# i1 K6 |5 k& ~否则他会看不到

细胞海洋

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( R& {/ t% k% Q, j" z( J7 N+ h请看8楼