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[请教] 请教胚胎聚合方面的问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-5-14 10:43 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近做胚胎聚合,可是胚胎一直聚合不上 ,我们在做的过程中发现,在去掉透明度后,仍有一层薄膜,胚胎一直聚合不上,想请教下这是怎么回事?
% R) J) Y$ V- U0 }) q+ |! S
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沙发
发表于 2012-5-14 11:26 |只看该作者
什么胚胎啊,透明带怎么去掉的?
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藤椅
发表于 2012-5-14 14:12 |只看该作者
通常来说,透明带是可以去掉的1 Z  d: g$ c7 v' G
如果遇到楼主这个情况应该是在去透明带时没有观察仔细
2 b' [6 y) s7 B你可以把那些看似还有一层薄膜的胚胎处理时间延长一些,“过处理”一下,让若干容易去除透明带的胚胎多处理一段时间,到时候可以淘汰不用。剩下的胚胎透明带应该大部分都去除了。
+ |; F( c3 U9 q$ [5 v另外聚合过程中一定要在一个小的空间里进行2 F4 e: a( v( K! R3 w# k
如果没有合适的工具5 T  z( U: B7 M% }
也可以考虑使用一些促进细胞粘连的试剂; i3 l0 Z# q! A* X5 H
楼主做的是ES聚合还是胚胎聚合(二倍体/四倍体)?' A9 z. B# m) _& c( e9 ~
用的ES细胞和胚胎的品系都是什么啊?
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板凳
发表于 2012-5-15 09:18 |只看该作者
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回复 have-a-rest 的帖子
$ G* N- e) ~0 S/ i4 V
# W; Z% ]8 H5 K( N7 j猪孤雌胚胎啊 用的是pronase

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报纸
发表于 2012-5-15 09:23 |只看该作者
回复 zpzp0312 的帖子
0 D4 k. f# ]2 u, ^4 \6 l- ]8 j: j; a1 b) m  I/ h! w( i9 Z
做的是猪孤雌胚胎聚合,做了几次都没有聚合上。9 r0 p. N/ \5 M6 O, n; T
你所说的小空间,可以是WOW培养系统吗?. f6 K8 m1 J8 ~7 A) [# G8 k
促进细胞粘连的试剂可以用什么,植物凝集素可以不?
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地板
发表于 2012-5-15 10:02 |只看该作者
看来你那里的实验室配套设施应该挺齐全的3 O0 D- r# ?# ?3 q; I  b
说的都对
5 _  i+ p9 E+ [: T; L/ k目前似乎就是透明带处理有问题了,多处理一段时间,通常来说在镜下应该能看出来是否已经除去透明带。
' M7 ~6 i) |$ O+ `- r" `) X8 \如果看不好就收集那些似乎沾到培养皿底部的胚胎,轻轻一吹就下来了。这样的胚胎透明带绝对已经去掉了!
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发表于 2012-5-16 09:51 |只看该作者
回复 zpzp0312 的帖子4 D) s! K4 G+ K5 ?
" @5 J( R0 ?! T3 k, m
我们试试多处理一段时间 看看效果
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