小鼠尾部成纤维细胞的培养问题

2006sw0657

你好 我最近也在试着养小鼠尾部成纤维细胞 请问 老鼠的 尾部 毛发 怎样去除 或者怎样正确取到想要得到的小鼠尾尖且不会染菌？ thank you

christophe

不是除去毛，而是将皮全部剥离。! w- c$ G0 R3 P5 i$ a6 Y0 t
我告诉你具体方法吧：
. s' f" D: i: y9 u尽量剪长些鼠尾，如果小鼠不继续养了，就把鼠尾全部剪了。
. }( D* x3 C/ i  ]2 m酒精中浸泡一下，然后放到PBS中，用剪刀或者刀片在尾巴粗端剪断处划一个小缺口，然后用尖头镊子夹住鼠皮翻转，夹牢翻转几圈以后，用力向下拽，整个尾巴的表皮就被翻转拽下来了，很完整的。将最上端剪去不要，剩下的再剪短放到medium中养就可以了，大概一周左右TTF就出现了。

yuanyan2010

做到无菌的话，要将剪好的老鼠尾巴放70%酒精里面浸泡20分钟。然后用无菌的器械将表面的鼠毛尽量去掉。我们也就做1cm左右的尾尖。4-5天左右可以看到。

2006sw0657

回复 christophe 的帖子5 R7 |* N$ U3 w$ E3 B  |
0 Q: ?9 N# T/ ~/ w
先向你说声 thank you   我先示范做一下 具体出现问题的话 再请教你

2006sw0657

回复 yuanyan2010 的帖子. K3 n! w! e4 [( \

& y, m: l+ W0 j. Q- g谢谢  我先试着做个预实验

2006sw0657

回复 christophe 的帖子3 q- I$ z/ o" \* N) d) x

- \8 C. t- |8 t: n; `4 k你好 我按照你的方法去做 养了三天 发现里面有许多密密麻麻的小颗粒， 师姐们说是细菌 怎样才能避免染菌呢  谢谢！

2006sw0657

回复 yuanyan2010 的帖子
3 y! q! {$ L7 Y4 X
4 `9 R4 |1 o- M4 t' ]5 r我把小鼠尾巴剪下来后放在75%酒精里面浸泡15分钟，然后剥皮，剪碎，放在六孔板里面养了三天，发现里面好多密密麻麻的颗粒 好像染菌了 怎样才能做到无菌呢 谢谢

christophe

是不是不大，但也不小，圆形透明的那种，但不会动？那不是染菌，正常的，再过两天，你仔细看平皿底部，会有MEF样的细胞贴壁就是了，至于这密密麻麻的颗粒可能是鼠尾迁移出来的TTF但还没贴壁铺展，或者其他种类的细胞。最好用贴壁性好些的平皿

christophe

回复 2006sw0657 的帖子, b0 Y/ i* {# N; X
. d' b5 q# B" A! K  O" c: K0 m
刚好在线，给你回复了

2006sw0657

回复 christophe 的帖子
) \; V& j4 B3 Q: J- s/ {" a  ~+ Q9 s( z+ O/ t
我有拍照的 不过可能内存太大，上传不上去，最近电脑好像坏掉了 ，刚开始是像你所说的那样，圆形透明的，不过今天（第3天）颜色变深了，好多密密麻麻的黑色颗粒，但培养基颜色也未曾变黄，我QQ ：670686944   如果方便的话 QQ联系