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小鼠尾部成纤维细胞的培养问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-5-23 10:40 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
你好 我最近也在试着养小鼠尾部成纤维细胞 请问 老鼠的 尾部 毛发 怎样去除 或者怎样正确取到想要得到的小鼠尾尖且不会染菌? thank you
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沙发
发表于 2012-5-24 23:37 |只看该作者
不是除去毛,而是将皮全部剥离。
! W* R0 W) k* E我告诉你具体方法吧:
9 g( i+ l- U' G  P" n尽量剪长些鼠尾,如果小鼠不继续养了,就把鼠尾全部剪了。
1 t8 O' w( O0 A* b酒精中浸泡一下,然后放到PBS中,用剪刀或者刀片在尾巴粗端剪断处划一个小缺口,然后用尖头镊子夹住鼠皮翻转,夹牢翻转几圈以后,用力向下拽,整个尾巴的表皮就被翻转拽下来了,很完整的。将最上端剪去不要,剩下的再剪短放到medium中养就可以了,大概一周左右TTF就出现了。
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藤椅
发表于 2012-5-25 09:45 |只看该作者
做到无菌的话,要将剪好的老鼠尾巴放70%酒精里面浸泡20分钟。然后用无菌的器械将表面的鼠毛尽量去掉。我们也就做1cm左右的尾尖。4-5天左右可以看到。
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板凳
发表于 2012-5-25 10:00 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 christophe 的帖子
( r3 _( u- g/ u/ a6 [# U  o5 s
  M7 V5 a  y! O( o% A- ]6 [1 E6 U- @先向你说声 thank you   我先示范做一下 具体出现问题的话 再请教你

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报纸
发表于 2012-5-25 10:01 |只看该作者
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( F; b$ b5 |# |# z: [* k# t1 {' }& `
谢谢  我先试着做个预实验

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地板
发表于 2012-5-29 20:36 |只看该作者
回复 christophe 的帖子0 _1 k1 ]1 f" a, ^( ~* [- @

8 Y# J  _4 E9 k* A) T你好 我按照你的方法去做 养了三天 发现里面有许多密密麻麻的小颗粒, 师姐们说是细菌 怎样才能避免染菌呢  谢谢!
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发表于 2012-5-29 20:39 |只看该作者
回复 yuanyan2010 的帖子" H6 h8 V( g! @6 @6 k& B* |7 Y8 n
2 ^) b! J+ g" o% M/ f- ?1 P. G
我把小鼠尾巴剪下来后放在75%酒精里面浸泡15分钟,然后剥皮,剪碎,放在六孔板里面养了三天,发现里面好多密密麻麻的颗粒 好像染菌了 怎样才能做到无菌呢 谢谢
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发表于 2012-5-29 20:43 |只看该作者
是不是不大,但也不小,圆形透明的那种,但不会动?那不是染菌,正常的,再过两天,你仔细看平皿底部,会有MEF样的细胞贴壁就是了,至于这密密麻麻的颗粒可能是鼠尾迁移出来的TTF但还没贴壁铺展,或者其他种类的细胞。最好用贴壁性好些的平皿
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发表于 2012-5-29 20:44 |只看该作者
回复 2006sw0657 的帖子
0 f% Z0 ~  j6 w2 t$ M) c& ?+ g% x+ }$ d$ x4 `; Y
刚好在线,给你回复了

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发表于 2012-5-29 20:52 |只看该作者
回复 christophe 的帖子
2 I" u; z' d, R/ A1 m- {+ u9 r; z8 b3 e- k  Y: y# D1 m! O+ R9 E: y
我有拍照的 不过可能内存太大,上传不上去,最近电脑好像坏掉了 ,刚开始是像你所说的那样,圆形透明的,不过今天(第3天)颜色变深了,好多密密麻麻的黑色颗粒,但培养基颜色也未曾变黄,我QQ :670686944   如果方便的话 QQ联系
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