大家看看我扩增的MEF是怎么回事

momocy

这个MEF是从CF-1小鼠的胚胎分离的，扩增到P3代了，培养皿里有一层类似树枝样分叉的脉络，显微镜下看到的图片是这样的。大家看看是怎么回事，是因为肝脏、四肢什么没分离干净，所以分化了么？4 Z4 ^/ h4 S5 w( t5 a

yongchen1314

MEF制备时除去不要的胎鼠组织，可以考虑培养基终止消化后静置5min，取上清离心种瓶，大的组织团块不要，细胞量是够的

yangpan521

杂细胞太多，建议分离时胎鼠去头、去尾、去四肢和去内脏。只用北部的一点点就足够了，有条件的话在300目的筛网过滤一下，效果非常好。

573639471

我遇到过，有两种可能：
% U, S# W0 @3 {" C4 ~第一，如果是从原代开始一直有，那就很明显是未消化的组织块贴壁后形成的克隆
' r7 a, _8 [) o6 I/ i( \第二，如果是P3传代后才出现的，那么是传代的时候消化过度，细胞黏连了，又没吹散，即细胞团形成的克隆

huangcong1988

看第二张图的时候我觉得是老化了，但是才P3，不至于啊，放大倍数说明一下可能好判断一些

momocy

回复 ligangtiancai 的帖子
( |$ E6 Q& q+ C' F! K6 y& a, G) H6 W1 m) _- U. r
不像啊，我这个细胞密度不大，而且我以前细胞长的密的时候也没有卷边啊，我一直很怀疑是分化组织没有剔除干净。

ligangtiancai

看上去像是细胞密度过大导致的卷边。。。我遇到过

iseeyou1210

是MEF, 但是消化不好，细胞成团，长成colonies。7 I$ L; z- F' O: I) ^
那些有分支的细胞可能是neuron细胞，但是太多了也不正常，传代以后会loss。4 F8 [) j7 n' U& T. h. u' y0 T
MEF一般都是分化的细胞，不存在什么分化的问题。

ontheway_hit

感觉细胞的界限不是很清楚，而且细胞长得像蝌蚪，不是MEF吧？

momocy

回复 不倒翁 的帖子6 g8 P5 b9 ]1 n5 z( i  O$ o
, w: B, S  x, W( c1 a% ~% [$ N2 J
是贴壁的