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大家看看我扩增的MEF是怎么回事   [复制链接]

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金话筒 优秀会员 美女研究员

楼主
发表于 2012-5-31 08:30 |只看该作者 |正序浏览 |打印
这个MEF是从CF-1小鼠的胚胎分离的,扩增到P3代了,培养皿里有一层类似树枝样分叉的脉络,显微镜下看到的图片是这样的。大家看看是怎么回事,是因为肝脏、四肢什么没分离干净,所以分化了么?4 Z1 D* g+ {# u# U/ k
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发表于 2012-6-4 17:44 |只看该作者
MEF制备时除去不要的胎鼠组织,可以考虑培养基终止消化后静置5min,取上清离心种瓶,大的组织团块不要,细胞量是够的
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金话筒 优秀版主

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发表于 2012-6-4 08:54 |只看该作者
杂细胞太多,建议分离时胎鼠去头、去尾、去四肢和去内脏。只用北部的一点点就足够了,有条件的话在300目的筛网过滤一下,效果非常好。
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发表于 2012-6-1 16:35 |只看该作者
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我遇到过,有两种可能:
0 ?' E5 ?$ E6 V  n' Q第一,如果是从原代开始一直有,那就很明显是未消化的组织块贴壁后形成的克隆: n; f5 S5 W5 p9 _8 Q6 X2 A* g
第二,如果是P3传代后才出现的,那么是传代的时候消化过度,细胞黏连了,又没吹散,即细胞团形成的克隆
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优秀会员 金话筒

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发表于 2012-6-1 14:14 |只看该作者
看第二张图的时候我觉得是老化了,但是才P3,不至于啊,放大倍数说明一下可能好判断一些
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发表于 2012-5-31 17:12 |只看该作者
回复 ligangtiancai 的帖子
7 V& t. P0 m/ d0 P
3 G; @$ w: }1 m# s! z7 r不像啊,我这个细胞密度不大,而且我以前细胞长的密的时候也没有卷边啊,我一直很怀疑是分化组织没有剔除干净。
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发表于 2012-5-31 15:21 |只看该作者
看上去像是细胞密度过大导致的卷边。。。我遇到过
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发表于 2012-5-31 15:17 |只看该作者
是MEF, 但是消化不好,细胞成团,长成colonies。9 H- U& z% C3 T+ P6 h
那些有分支的细胞可能是neuron细胞,但是太多了也不正常,传代以后会loss。
4 ~+ }2 \' p9 G1 w3 T7 n1 ~3 DMEF一般都是分化的细胞,不存在什么分化的问题。
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发表于 2012-5-31 14:01 |只看该作者
感觉细胞的界限不是很清楚,而且细胞长得像蝌蚪,不是MEF吧?
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发表于 2012-5-31 13:54 |只看该作者
回复 不倒翁 的帖子
1 `  f- p$ u& H5 Z  S0 W
: j( k/ G# x0 ^- e: E' Q是贴壁的
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