mRNA的表达量与Western blot检测的一致性

燕北飞

大家有没有碰到过这样的情况，检测某基因的表达量时，qRT-PCR和Western blot检测不一致？

runsong

有的，有篇文章上检测sox2在小鼠睾丸上的表达，RNA很强，蛋白没有。

xiaomao_zhoubo

转录后需要翻译才能产生蛋白，而翻译受很多因素调控，因此两者不一致是有可能的

燕北飞

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$ A- Y$ D1 X: o  T! y呵呵，我再加一句，miRNA不需要翻译成蛋白，所以qRT-PCR用来检测miRNA的表达效果是可信的，检测某基因的表达却不一定可信。

minshuyin

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+ [1 R7 l5 P" c; u6 k
) R3 D' G1 l7 \/ u- d7 B您的意思是miRNA在RNA水平和蛋白水平不可比？

illidancui

miRNA属于非编码RNA，以RNA形式就发挥功能了呀。

燕北飞

回复 minshuyin 的帖子/ Y& x+ V0 s7 n$ U
! k) Q  b+ l2 H( ]4 P9 y
是mRNA与蛋白水平很多情况下是不一致的。miRNA只有RNA水平，没有蛋白水平。

linzi214

真正起功能的是蛋白，由于mRNA转录出来受miRNA调控和其他修饰的调控，因此mRNA不一定翻译为蛋白，功能蛋白检测蛋白表达水平结果更可信（miRNA除外）。

minshuyin

回复 燕北飞 的帖子* R& O* _4 ]5 J' [/ N& R

! E7 p; [+ ]5 J( g2 Q是的，但是很多人做miRNA实验，发表的论文中经常会有mRNA水平变化不大，蛋白水平差异明显啊。

燕北飞

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4 r0 X6 ^$ m: K0 o; }& k! ?1 X! D
- @; m7 `; ?: T1 M8 _5 |$ K你说的这个是miRNA的调控方式问题，从miRNA沉默靶基因mRNA的方式上分析，miRNA不会降低靶基因mRNA的水平，只能沉静蛋白表达，我个人不认同很多文献里细胞实验的结果。感觉改变miRNA水平后的细胞拿来做基因芯片筛选靶基因的方式不可信！