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小鼠不好的克隆如何处理? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-6-19 09:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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内容如题,小鼠的克隆长的不好怎么办呢?挑出来么?新手没试过啊!

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沙发
发表于 2012-6-19 11:09 |只看该作者
如果是有部分长得不好,分化什么的,可以在显微镜下用marker笔在培养皿底部的相应位置标示出来,然后用枪头刮掉或者用泵吸掉。
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藤椅
发表于 2012-6-19 13:59 |只看该作者
一种是如上面说的吸掉,还有就是要2-3天传一次,不要长太长时间。
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板凳
发表于 2012-6-19 14:19 |只看该作者
传代的密度稀一点
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报纸
发表于 2012-6-19 15:35 |只看该作者
回复 wwy551 的帖子' \% M. w& Q0 S+ F$ O$ g
% N% [# p  O" K# c. D3 N2 M
请问这个操作是要在超净台里完成么?用体视镜?能不能把好的克隆单独挑出来传代,就像人的那样?
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地板
发表于 2012-6-19 15:47 |只看该作者
回复 xiaxin1900 的帖子' K; Y; ?- n2 F' C, d+ @

9 ?3 Y* ?; n. h) e- G7 \请问细胞达到什么样的状态的时候需要传代呢?小鼠的传代就是酶消,打散,接种这样子么?还有什么注意事项么?
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发表于 2012-6-19 15:53 |只看该作者
回复 song58 的帖子
2 d0 W$ N* x" c* I- `8 `6 `3 {) ]3 v: v  T" t$ Q( c5 H6 c) [1 u* U
请问,这个“密度稀一点”怎么把握呢?细胞到什么状态的时候应该传代?传代的比例或者细胞密度应该在多少比较合适呢?
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发表于 2012-6-19 15:56 |只看该作者
mES 传代是细胞一般是2-3天,此时细胞都很致密并且发亮程圆形。细胞不能连成片才传。
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发表于 2012-6-19 16:00 |只看该作者
回复 xiaxin1900 的帖子
+ s( i% y' x! ~4 y( l8 E7 |& N7 a) {( G% R% A; E
请问您在mES传代的时候是如何操作的呢?是酶消化进行的么?您用的酶是什么酶呢?传代过程中有什么要注意的呢?
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发表于 2012-6-19 16:03 |只看该作者
胰酶,和你上面提到的传代方法一样。没有什么特别的,消化时不要时间太长,消化后用吹成单细胞在接种。
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