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小鼠不好的克隆如何处理? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-6-19 09:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
内容如题,小鼠的克隆长的不好怎么办呢?挑出来么?新手没试过啊!

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沙发
发表于 2012-6-19 11:09 |只看该作者
如果是有部分长得不好,分化什么的,可以在显微镜下用marker笔在培养皿底部的相应位置标示出来,然后用枪头刮掉或者用泵吸掉。
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藤椅
发表于 2012-6-19 13:59 |只看该作者
一种是如上面说的吸掉,还有就是要2-3天传一次,不要长太长时间。
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板凳
发表于 2012-6-19 14:19 |只看该作者
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传代的密度稀一点
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报纸
发表于 2012-6-19 15:35 |只看该作者
回复 wwy551 的帖子
. r9 S9 U$ k2 Y! M3 f' i% L2 {0 C$ [9 g, i0 q- G, Q
请问这个操作是要在超净台里完成么?用体视镜?能不能把好的克隆单独挑出来传代,就像人的那样?
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地板
发表于 2012-6-19 15:47 |只看该作者
回复 xiaxin1900 的帖子" w; U, J5 U: k4 k1 `

9 H& Y  K' d: J5 V请问细胞达到什么样的状态的时候需要传代呢?小鼠的传代就是酶消,打散,接种这样子么?还有什么注意事项么?
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发表于 2012-6-19 15:53 |只看该作者
回复 song58 的帖子
5 s% A& ^  @  {, P% G- e% {
( \/ C0 Q' e( @0 n6 P0 c请问,这个“密度稀一点”怎么把握呢?细胞到什么状态的时候应该传代?传代的比例或者细胞密度应该在多少比较合适呢?
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发表于 2012-6-19 15:56 |只看该作者
mES 传代是细胞一般是2-3天,此时细胞都很致密并且发亮程圆形。细胞不能连成片才传。
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发表于 2012-6-19 16:00 |只看该作者
回复 xiaxin1900 的帖子
( T" P' N' b* M1 X0 s1 u. B8 {5 L, N# V
请问您在mES传代的时候是如何操作的呢?是酶消化进行的么?您用的酶是什么酶呢?传代过程中有什么要注意的呢?
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发表于 2012-6-19 16:03 |只看该作者
胰酶,和你上面提到的传代方法一样。没有什么特别的,消化时不要时间太长,消化后用吹成单细胞在接种。
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