hiPS传代时的消化问题

stemcellmeng

如果iPS消化的时间比较长还下不来，就有可能是分化了。

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1 u4 g  R8 c% |- j& g2 h
: p( Z. W. }2 s9 E% _用PBS配的

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/ ^- I8 |: o! `+ p$ D- C" z3 j2 {$ c$ X3 x& X8 a! _
iPS是人的，feeder 是鼠的

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6 j9 L4 b2 H# T! ]! ^
( P5 b; U7 L: |2 K不会吹散吗

573639471

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7 Q/ m) S- F  A: N; }& I; ]" }6 E# X9 O4 N- m) C" o
你买的是哪公司的？ 好用吗 用DMEM/F12配的？

BNJN

Gibco的，我实验室的hiPS、hESC传代都用，5min后看见克隆边缘有卷起就行了

白巧克力

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( K8 L' \7 I& L' Q6 q8 h) T2 P
Gibco的，具体与楼上BNJN相同。

573639471

回复 fguw 的帖子: D0 N3 R5 M6 h6 G/ j+ u% t- e" |7 A
! C( k) S8 N! L$ j- _* o: G
配的有什么问题？除了不应该用PBS还有吗

fguw

比较标准的是，DMEM/F12（1：1）
. U+ h- L# s9 L0 w因为基础培养基就是这个，: _* I! E/ I8 U3 v* p2 S' F0 _. t
我们实验室做过实验，发现这个最好，

也行天下

       feeder太密了！iPS克隆中间的细胞好像已经有分化了吧，这可能也是iPS克隆消化不下来并且细胞较散的原因吧。
, ]3 l( @- H& F% d% k    我们用胶原酶消化一般40-50分钟至iPS克隆明显卷边，即使克隆完全消化下来了细胞也不会像图中的那样散。  r% B( |( b% ?* V- B4 V