急！各位高手有谁检测小鼠组织中的人的细胞？

lipd09@mails

各位高手有谁检测小鼠组织中的人的细胞？用的啥抗体呀？那家？不胜感激！急啊！

lipd09@mails

回复 tinatina 的帖子# Q9 a" ^# @1 j* u9 I; O7 E8 ]) e2 R

3 T6 C/ s$ {# Q7 l+ G6 _您还知道其它家的检测人细胞核的抗体吗？我之前用了 Millipore Corporation，不好使，完全按着它给的步骤做了好多次都没染出来！

lipd09@mails

回复 frankieisme 的帖子# z1 D2 q# l' H3 ~% X3 X0 {

" I; H# k" y1 X( s) ~我做的是有关干细胞安全性评价方面的动物实验，想知道细胞最终归巢到何种脏器了。* G4 K' c( z5 r8 I/ m5 c

lipd09@mails

回复 tinatina 的帖子
' T( u7 _* e; w" B9 F9 g) T
+ x8 K* u3 H5 j8 [% C2 r! e9 V7 l太感谢了！！！
. L8 \5 I8 ~4 a; ]

lxm5668

学习了，谢谢！

tinatina

有三种方法可以检测小鼠体内的人细胞：& M) E. v  c: }1 v* v
1) 定量PCR， for Alu sequence with primers: GTCAGGAGATCGAGACCATCCC (forward sequence) and TCCTGCCTCAGCCTCCCAAG (reverse sequence),
' d+ w6 I/ y8 }$ x: }2) 免疫组化，采用 mouse anti-human nuclei IgG1 monoclonal antibody (clone 235-1, catalog number: MAB1281; Millipore Corporation, Billerica, MA) 染的是细胞核，人的细胞和有染色，小鼠的没有免疫活性。
6 F, z+ e- {, |4 O0 C3) 原位杂交，用探针human-specific pan-centromeric probe  f, u. _) M2 r$ |& {

4 _5 R8 D5 `" H. o& N' H9 i7 x具体方法和细节参看附件2012 年3月的文章
& o, e" U5 K3 s( ^ 检测在小鼠体内的人细胞方法2012.pdf (988.62 KB)

2012-6-29 08:37 上传

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pailishi

你要检测什么细胞啊？我们检测人的EPC可以用特异性的凝集素UEA-I

frankieisme

做免疫组化的话最好知道是人的什么细胞,在小鼠体内的定位,这样才好选择合适的特异性的抗体.

frankieisme

Detected of Alu sequence in transplanted mouse lung RNA was performed by qPCR, using the flowing primers: GTCAGGAGATCGAGACCATCCC ( forward sequence ) and TCCTGCCTCAGCCTCCCAAG ( reverse primer ), Alu elements are specific to the human genome and are present at ~ 1 million copies/diploid sequence, making them a sensitive indicator of human cell content.