急！各位高手有谁检测小鼠组织中的人的细胞？

lipd09@mails

各位高手有谁检测小鼠组织中的人的细胞？用的啥抗体呀？那家？不胜感激！急啊！

frankieisme

Detected of Alu sequence in transplanted mouse lung RNA was performed by qPCR, using the flowing primers: GTCAGGAGATCGAGACCATCCC ( forward sequence ) and TCCTGCCTCAGCCTCCCAAG ( reverse primer ), Alu elements are specific to the human genome and are present at ~ 1 million copies/diploid sequence, making them a sensitive indicator of human cell content.

frankieisme

做免疫组化的话最好知道是人的什么细胞,在小鼠体内的定位,这样才好选择合适的特异性的抗体.

pailishi

你要检测什么细胞啊？我们检测人的EPC可以用特异性的凝集素UEA-I

tinatina

有三种方法可以检测小鼠体内的人细胞：
; o  j" ~' U% {8 L: B1) 定量PCR， for Alu sequence with primers: GTCAGGAGATCGAGACCATCCC (forward sequence) and TCCTGCCTCAGCCTCCCAAG (reverse sequence),
) k9 z, _# a* T+ s3 P2) 免疫组化，采用 mouse anti-human nuclei IgG1 monoclonal antibody (clone 235-1, catalog number: MAB1281; Millipore Corporation, Billerica, MA) 染的是细胞核，人的细胞和有染色，小鼠的没有免疫活性。
, x" ?5 {$ {9 E0 m/ _. C3) 原位杂交，用探针human-specific pan-centromeric probe! q4 C9 \! X: w& E& b# R

! k9 g- u6 ^2 S0 D2 V' i具体方法和细节参看附件2012 年3月的文章. s, b% L; `& i! ^/ s
检测在小鼠体内的人细胞方法2012.pdf (988.62 KB)

2012-6-29 08:37 上传

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lxm5668

学习了，谢谢！

lipd09@mails

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/ d1 C! j8 k7 D$ K' Q8 N/ N: n! ]  j% [, G, [
太感谢了！！！- N2 M2 G# K( z

lipd09@mails

回复 frankieisme 的帖子; t! K9 u( w, F) [

. v7 P* ~1 {( r. p# n" x; N. ~我做的是有关干细胞安全性评价方面的动物实验，想知道细胞最终归巢到何种脏器了。
$ d* `: u) M- _

lipd09@mails

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: ]6 k1 I+ c& X* {5 O
- g# R9 M, o; W) ]# s+ i. w. V您还知道其它家的检测人细胞核的抗体吗？我之前用了 Millipore Corporation，不好使，完全按着它给的步骤做了好多次都没染出来！