MEF细胞形态异样

nichifanlema2

3 S& C# w0 d, K$ J; ?' o
9 r  m# w6 p$ V# v  M8 v: jT75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：
" k( r4 J+ V* M) x1.细胞复苏不好；* u  ^/ q( b% N/ R; L# j
2.传代不均匀。1 A8 Q" @) E- V; n7 j+ ~, V
另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

回复 yaolinzhang 的帖子- y) b/ s; \" S0 `/ I% V: U
+ t# u3 ]- e% R1 R' m# F2 B
感谢前辈指点，多谢！

runsong

回复 nichifanlema2 的帖子3 D$ w4 K! E, ~/ H2 Y
7 `: ]- _/ q* a- G7 P  j
别听他的。
! I9 `2 B; \/ J) j/ r) I- y其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

回复 nichifanlema2 的帖子
2 t4 l9 M; x0 e5 j4 G
8 H# h% z) ^3 _附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

回复 runsong 的帖子
1 x, R2 M  D6 p0 s2 J! ~; i4 g8 {9 k" f! D, }
消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

回复 wawj 的帖子
  i( N6 F. U  m$ Q. A) h( H
1 C5 w' [  S  r% ]5 i+ m' I# Y如图

2012-7-7 10:19 上传

下载附件 (107.91 KB)

nichifanlema2

回复 scottist 的帖子
) i- V* J0 P6 e) G( w
. W/ f3 ]* L8 f8 V3 h, c感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

回复 nichifanlema2 的帖子( ^) R9 ~: d: N7 }+ c/ j5 v
$ t3 H/ i5 Y6 T% ~; f+ A! I* R5 v3 K
图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。