MEF细胞形态异样

nichifanlema2

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3 ^- O; G1 h' W% \: a
T75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：
8 e, L, m; i% P1.细胞复苏不好；
. A& n3 G& m) p" ~2.传代不均匀。
4 L7 C: i7 S6 T+ T  p# b8 r# @# W另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

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  H( X! N$ Q# n/ t3 |* A0 A9 R$ y2 T# d7 B7 K; V$ B
感谢前辈指点，多谢！

runsong

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% P- s' |/ _6 _: [  P. G4 B) Q/ L别听他的。
1 O6 y8 }! M" g9 k/ p) O% \其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

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  t5 i6 a2 n! W& ~3 o& u
" Y; g4 C6 A/ [! _附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

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( V7 f6 L" u; M9 K5 M$ Y8 P$ B! ?# f* q3 x: h! s$ A' c9 Z
消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

回复 wawj 的帖子5 T  F; g- ?: \1 Y& t" z8 ?8 o! w1 V) |

9 s; f) q6 m3 g  c1 }! g如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

回复 scottist 的帖子0 T, B4 Q8 L' k

/ ~/ _( k2 o6 b; ]) o感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

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( ?5 q4 F5 U, ^6 K/ a* c4 ?8 D
% n  y9 J3 j7 a7 i* C. M图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。