MEF细胞形态异样

nichifanlema2

8 u3 t' `* ]6 l, |1 u' I- ?1 N$ L  M, R- f# T. Z% E3 z
T75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：
6 F$ Q6 ~1 \) ^$ n- O$ Q( D! ?6 x$ p1.细胞复苏不好；
0 k7 [- n* ]4 x% U0 `' f2.传代不均匀。/ l/ G2 [+ C5 g( K$ {1 v
另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

回复 yaolinzhang 的帖子$ y1 y* e7 @% B7 z. p

* p4 f- b! h0 {8 K& ?+ I, D感谢前辈指点，多谢！

runsong

回复 nichifanlema2 的帖子3 W9 G( \9 R$ I* U6 `) I

$ E6 Y+ Q8 X3 r; d3 G1 I$ ~别听他的。
/ ]! ^. k" h, Q$ @其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

回复 nichifanlema2 的帖子# d' Q" j0 H$ X0 @3 p4 P

+ {% ^6 }' n* ~附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

回复 runsong 的帖子8 K8 R$ Z0 T3 X6 F; U
  S" O' W+ P$ [+ s0 q- e  K
消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

回复 wawj 的帖子
8 U+ j+ k" O  [$ }3 a( Q4 q& X! J# O4 u7 r7 k5 _
如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

回复 scottist 的帖子
, D: ?: ?" P: f$ x: q4 Y$ d7 i, J8 n
感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

回复 nichifanlema2 的帖子
: @4 C+ ?" |% t' r; Z5 }
7 R) z! Q5 X; `- ?+ R* r9 O图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。