MEF细胞形态异样

nichifanlema2

# F( X# F, P; ~7 c

0 O' _) u% V& \2 H$ E* {2 RT75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：& p( t' z+ [! E3 Y( x: e
1.细胞复苏不好；
$ N9 j1 F( p" J2.传代不均匀。
% x) J! n3 m6 V5 h1 E+ g7 ~另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

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) _. k. p2 W; s: y. \7 |$ z
5 O) f3 G3 q. Y7 @  v: M, Q, _感谢前辈指点，多谢！

runsong

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' z4 M2 W* ^' L( F/ z8 g# c7 N) h1 c
别听他的。7 @$ H* n7 f3 D% R, H! y
其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

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9 b- \, P; s- }( l$ v3 G9 t4 `. |$ L) T& k, ^+ c+ d9 K  J  u
附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

回复 runsong 的帖子7 u0 \$ K- o, a0 A
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消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

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6 T: H: U/ o4 e+ y% H. I' ^7 r- T; P( M; e0 E# n
如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

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5 l" g' Y5 j, r& h
* W. d, W) {/ O1 Q  X0 N  e感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

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图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。