MEF细胞形态异样

nichifanlema2

' f% a& e& g$ P. X% s3 v8 {  o
2 `8 _& y: w: aT75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：$ T, p) s) }1 X( e. {6 L
1.细胞复苏不好；( g3 b" V9 l& |
2.传代不均匀。
  ~! U5 W9 S) j% q+ P6 A3 ^6 e& C另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

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/ U0 g2 ~& A% y6 g6 |& ^
; w# _- K. T. W, x5 k感谢前辈指点，多谢！

runsong

回复 nichifanlema2 的帖子/ g+ ~+ @, T" S. C

4 F5 a- R$ {2 R0 e9 a别听他的。
1 f) s+ ?9 T3 k) K% ~其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

回复 nichifanlema2 的帖子$ _3 w: z3 O1 V% K4 I

; z8 u9 p4 e8 ]* M' O2 |! ?; B附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

回复 runsong 的帖子8 C8 W. }1 b1 C6 z. Z4 F+ p
- G+ R, e) w. V
消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

回复 wawj 的帖子
. o2 Y' [; X. G9 c5 V
, c; a3 ]/ C# R6 G+ Q3 s如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

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7 L6 A8 S& G( B6 V( x6 q4 Q. I: d$ @* X  `
感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

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( w0 j8 N$ r  _6 b$ V) T" f0 v# y) a. u
图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。