MEF细胞形态异样

nichifanlema2

0 s; h' s* _7 g% D* `
% I7 y$ M# V- `5 w# VT75传代到T175后两天的P2代MEF细胞，怎么不是梭型，各种形状都有啊，为什么？请求前辈指点，非常感谢。

yaolinzhang

可能原因：
; E, q3 ^" O% `: H- l1.细胞复苏不好；
7 _& n0 C$ z: I2.传代不均匀。
* M. [. `3 Y$ ]  h; ]8 m8 b另外，起初形态不均匀是正常的，传几代就好的。我刚开始也是这样，后边还可以。多养几次就好了~！没大问题

nichifanlema2

回复 yaolinzhang 的帖子0 S6 o4 c0 M0 U4 |/ b* |
) ~) M! p1 ]! ^& G  r# f6 L9 z+ |
感谢前辈指点，多谢！

runsong

回复 nichifanlema2 的帖子3 T* a; h, w+ h3 i
5 m9 n9 g- @+ R% b* e
别听他的。
. l# I/ w" {1 O6 v% E( M. X6 {其实各个实验室养MEF没几家养的和文章上的那么好看，都是奇形怪状的。我认为可能是取胚胎时胚龄太大或是消化过分。MEF传3代就不能用了，不要指望传代后状态会好转。

wawj

回复 nichifanlema2 的帖子
3 v( n3 c, P. v+ d3 _6 B: i) L/ G
附图上来看看，你取得是几天的胚胎，一般取13-14天比较好。原代的话有一些杂细胞，但你都传到第二代了，应该比较纯了。再传一代试试，一般取3到5代的ＭＥＦ做饲养层。

scottist

可以参考yamanaka实验室那篇Nature Protocol，文章中的MEF细胞图显示的MEF也不是梭形的。个人经验，较大胚胎（>20）或成年小鼠的成纤维可呈梭形，而13-16天胎鼠养的MEF不是梭形的。

nichifanlema2

回复 runsong 的帖子* s7 U3 e/ k' |$ A& h
8 Q- ~- u' y# h
消化过度会导致细胞出现什么样的变化啊？感谢指教啊~~

nichifanlema2

回复 wawj 的帖子
% P4 v: l' b+ l/ l. L2 {
8 E2 ~7 d( A" Q) f; t' C; D如图

2012-7-7 10:19 上传

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nichifanlema2

回复 scottist 的帖子+ l* }( [- j7 u' l4 Y" G, Y9 |6 G( C; Y
( n/ L4 @/ T- N" @- @; v
感谢您的指教，能不能附一个文章PDF，那篇文章收费下不到，感激不尽啊。

wawj

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, b) Z2 t- N1 a! R; E3 _5 M, c, C8 \6 T% W" B# R  F0 U
图片有点不清楚，你这是放大20倍的？是杂细胞有点多，到第三代再看看。不行的话就得重新做原代了。